همسانه سازی ژنGFP و انتقال آن به هستهChlamydomonas Reinhardtii

سیستمهای بیانی متفاوتی برای بیان پروتئینهای نوترکیب مورد استفاده قرار میگیرند. استفاده از میکروالگ کلامیدوموناس به عنوان مدت زمان کوتاه از زمان انتقال تا تولید ¸ سیستم بیانی پروتئینهای نوترکیب با توجه به مزایای آن ازجمله یوکاریوت بودن، رشد سریعمحصول ، آسان بودن افزایش مقیاس ، مصرف خوراکی و عدم آلودگی به توکسینها و پاتوژنهای انسانی توجهات زیادی را به خود جلب کرده است. پروتئین فلوئورسنت سبزGFP پروتئینی است که اولین بار از ژله ماهی به نامAequorea Victoriaجداسازی شد GFP به عنوان یک گزارشگر، برای مشاهده بیان ژن و موقعیت پروتئین درون سلول به کار می رود. تشخیصGFPتنها به پرتو تابی با نور آبی و یافرانبفش نیاز دارد و به هیچ سوبسترای خارج سلولی و یا دستگاه پیچیده و تجهیزات گرانبها نیازمند نیست. هدف از این پژوهش کلون GFPدرون وکتوربیانی مناسبpChlamy3و انتقال آن به هسته جلبک سبزChlamydomonas Reinhardtiiو ایجاد سیستم بیانی نوترکیب در میکروالگ می باشد. در این پژوهش ژن گزارشگرGFPموجود در وکتورpKScGFPتوسطPCR تکثیر شده و محصول PCR و وکتورpChlamy3 توسط آنزیم های محدود کنندهNot و 1 Kpn1 برش داده و محصولات دایجست شده توسط لیگاز به هم متصل و به درون باکتریTOP10ترانسفورم شد، سپس به هسته جلبک کلامیدوموناس رینهاردتی منتقل شدهاست

کلیدواژه ها:

پروتئین فلوئورسانت سبز ، پروتئین نوترکیب ، میکرو الگChlamydomonas Reinhardtii ، انتقال به هسته