تشخیص مولکولی برنج های تراریخته با روشPCRبر مبنای ژنtNOS

مقدمه: افزایش جمعیت کره زمین و کمبود منابع غذایی از یک سو، و آثار مضرر کشاورزی سنتی بر محیط زیست از سوی دیگر ، نگرانی های بسیاری در مورد توانایی جهان برای تولید غذای کافی به منظور تغذیه جمعیت در حال رشد را پدید آورده است. حال آنکه علمبیوتکنولوژی پاسخی بلند مدت برای رفع این مشکلات را یافته است که استفاده از موجودات تراریخته با خصوصیات مفید می باشد . ازطرفی ورود این محصولات به بازار های جهانی با مخالفت های بسیاری همراه بوده است. بطوریکه قانون گذاران کشور های مختلف وجود مقرراتی برای کنترل این محصولات و داشتن برچسب های قابل اطمینان جهت اطلاع رسانی به مصرف کنندگان را الزامی دانستهاند. بنابر این نیاز به وجود قوانیین بر چسب گذاری و ملزومات تجاری واحد و یکسان در میان کشور ها بسیار احساس می شود. برنج یکی از مهمترین محصولات غذایی می باشد که قوت غالب برای بیش از نیمی از جمعیت جهان است و تغییرات ژنتیکی بسیاری را در این رابطه متحمل شده است. هدف: در این مطالعه سعی بر آن است تا با معرفی روشی سریع، حساس و در عین حال دقیق به منظور شناسایی برنج های تراریختهبرچسب گذاری نشده موجود در بازار ایران پرداخته شود. روش بررسی: ابتدا 27 نمونه برنج از پرمصرف ترین اقلام موجود در بازار مصرفی استان های تهران و البرز شامل انواع داخلی و خارجی جمع آوری شد. سپس استخراجDNAبه روش استانداردCTABصورت گرفت. تست PCRبر پایه ی ژن بومیPEPCexبهمنظور اثبات حضور ژنوم برنج و ژنtNOSجهت غربالگری نمونه های مثبت از نظر تراریختگی انجام شد. سپس حساسیت تستPCRمورد سنجش قرار گرفت و در آخر کلونینگ ژن بومیPEPCexوپروموتر ژنtNOSانجام گردید.یافته ها: تستPCRشناسایی برنج بر اساس ژن بومیPEPCexو غربالگری برنجهای تراریخته بر اساس tNOSاپتیمایز و سپس بوسیله پلاسمید pTZ57Rدر باکتری اشریشیا کلیJM107کلون گردید. 48 % از برنج های متداول در بازار ایران حاوی پروموترtNOSبوده و تراریخته ژنتیکی می باشند، درحالی که هیچ یک از نمونه های مثبت شده و مورد آزمایش دارای برچسب تراریختگی دراین رابطه نبودند

کلیدواژه ها:

واکنش زنجیره ای پلیمراز ، برنج ، تراریخته ، پروموترtNOS