تاثیر تانن های متراکم خالص شده گل های درخت چنار بر فعالیت های بدخیم سلول های سرطان پستان

هدف: گل های درخت چنار سرشار از تانن های متراکم هستند که دارای ویژگی های زیست فعال متعددی گزارش شده اند. با این حال، اثرات ضدسرطانی اختصاصی این ترکیبات بر سلول های سرطان پستان سه گانه منفی هنوز به خوبی شناخته نشده است. هدف پژوهش، ارزیابی اثرات وابسته به دوز این ترکیبات بر تکثیر سلولی، مهاجرت سلولی و بیان ژن های کلیدی مرتبط با بدخیمی (PCNA و MMP۹) در سلول های سرطان پستان MDA-MB-۲۳۱ بود.مواد و روش ها: سلول های MDA-MB-۲۳۱ با غلظت های متوالی تانن های متراکم خالص شده گل چنار (۲۵/۱، ۵/۲ و ۵ میلی گرم بر میلی لیتر) تیمار شدند. تکثیر سلولی از طریق محاسبه زمان دوبرابر شدن سلول ها با استفاده از میکروسکوپی تایم لپس (Time-lapse) و رهگیری تک سلولی توسط نرم افزار ImageJ ارزیابی شد. مهاجرت سلولی با استفاده از آزمون ترمیم زخم مورد بررسی قرار گرفت. میزان بیان ژن های آنتی ژن هسته ای سلول های در حال تکثیر (PCNA) و متریکس متالوپپتیداز ۹ به روش RT-qPCR اندازه گیری شد. نرخ تقسیم سلولی و مهاجرت ناشی از ترمیم زخم به طور مداوم با استفاده از سامانه تصویربرداری زمان گریز Axio Imager پایش گردید. تحلیل های آماری با نرم افزار GraphPad Prism انجام شد.یافته هاتحلیل های تایم لپس پاسخ وابسته به دوز آشکاری را نشان دادند. غلظت های بالاتر تانن های متراکم (۵/۲ و ۵ میلی گرم بر میلی لیتر) موجب مرگ کامل سلول ها در ساعت نخست تیمار شدند. تیمار با غلظت ۲۵/۱ میلی گرم بر میلی لیتر بدون ایجاد سمیت حاد، اثر سیتواستاتیک (مهارکننده رشد سلولی) قوی ایجاد کرد و زمان دوبرابر شدن سلول ها را به طور معنی داری از حدود ۱۸ ساعت در گروه شاهد به حدود ۲۲ ساعت افزایش داد (P<۰.۰۵). نتایج آزمون ترمیم زخم نیز کاهش معنی دار بسته شدن زخم را پس از ۲۴ ساعت نشان داد؛ به طوری که میزان ترمیم زخم در گروه های تیمارشده ۶۵ تا ۷۵ درصد بود، در حالی که این مقدار در گروه شاهد بین ۸۰ تا ۹۵ درصد مشاهده شد (P<۰.۰۵). بررسی های مولکولی نشان داد که تیمار با ۲۵/۱ میلی گرم بر میلی لیتر تانن متراکم، بیان ژن PCNA را ۶۵ درصد و بیان ژن MMP۹ را ۴۰ درصد کاهش می دهد. الگوی تغییرات بیان ژنی مشاهده شده کاملا با نتایج آزمون های تکثیر و مهاجرت سلولی همخوانی داشت.نتیجه گیری: تانن های متراکم خالص شده جداشده از گل های چنار، فعالیت ضدبدخیمی قابل توجهی علیه سلول های سرطان پستان سه گانه منفی MDA-MB-۲۳۱ نشان دادند. این اثر از طریق دو سازوکار اصلی اعمال می شود: مهار تکثیر سلولی از طریق کاهش بیان ژن PCNA و مهار مهاجرت سلولی از طریق کاهش بیان ژن MMP۹. یافته های این پژوهش نشان می دهد که تانن های متراکم گل چنار می توانند به عنوان گزینه های امیدوارکننده ای برای توسعه داروهای ضدسرطان مورد توجه قرار گیرند.

کلیدواژه ها:

تانن های متراکم ، تصویربرداری زمان گریز ، درخت چنار ، MDA ، PCNA