ارزیابی فعالیت آنزیم تریپسین استخراج شده از ضمائم پیلوریک و روده تاسماهی سیبری (Acipenser baerii) تحت تاثیر برخی عوامل فیزیکی و شیمیایی

در ماهیان دارای معده، پپسین، تریپسین و کیموتریپسین مهمترین آنزیم های پروتئازی هستند، جایی­ که تریپسین همراه با دیگر پروتئازها و پپتیدازهای قلیایی، هضم اسیدی پروتئین انجام شده در معده را تکمیل می کند. بنابراین، فعالیت آنزیم تریپسین می تواند به عنوان یک شاخص ارزشمند برای بررسی وضعیت تغذیه ای ماهی تلقی شود. هدف از این مطالعه، بررسی اثر برخی عوامل فیزیکی و شیمیایی بر فعالیت آنزیم تریپسین استخراج شده از زوائد باب المعدی و روده تاسماهی سیبری (Acipenser baerii) بود. امعاء و احشای ماهی بعد از انتقال به آزمایشگاه و جداسازی زوائد باب المعدی و روده، در بافر mM۵۰ تریس HCl همگن شده و در دمای ۴ درجه سانتی گراد سانتریفیوژ شد. سپس، مایع رویی به دست آمده برای بررسی فراسنجه های فیزیکی و شیمیایی شامل دمای بهینه، پایداری دمایی، pH بهینه، پایداری pH، بازدارنده ها و یون های فلزی بر فعالیت آنزیم استخراج شده استفاده شد. یافته ها نشان داد که دما و pH بهینه فعالیت آنزیم استخراج شده از زوائد باب المعدی و روده به ترتیب ۵۵ درجه سانتی گراد و ۸ بود و در دمای۵۰-۱۰درجه سانتی گراد و pH ۱۱-۷ نیز پایدار بود. بازدارنده های SBTI، TLCK،PMSF ، TPCK، پپاستاتین A، یدواستیک اسید و EDTA به طور معنی دار از فعالیت آنزیم جلوگیری کردند، جایی ­که SBTI و TLCK اثر مهارکنندگی کاملی بر فعالیت آنزیم داشتند (۰۵/۰>P). فعالیت آنزیم تریپسین استخراج شده از زوائد باب المعدی و روده در حضور یون هایCa۲+ وMg۲+ افزایش معنی دار و در حضور یون هایCu۲+،Ba۲+،  Zn۲+وAl۳+ کاهش معنی دار داشت (۰۵/۰>P). بر اساس نتایج به دست آمده، فعالیت آنزیم تریپسین استخراج شده از زوائد باب المعدی و روده تاسماهی سیبری به طور معنی دار تحت تاثیر فراسنجه های فیزیکی و شیمیایی مورد مطالعه قرار داشت که ممکن است بر فعالیت بهینه این آنزیم در فیزیولوژی گوارش تاسماهی سیبری موثر باشد.

کلیدواژه ها:

تاسماهی سیبری ، تریپسین ، روده ، ضمائم پیلوریک