تاثیر محافظتی آلفالیپوئیک اسید بر الگوی بیان ژن های دخیل در آپوپتوز سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موشی در فرایند انجماد

هدف از این مطالعه بررسی اثر محافظتی آلفا لیپوئیک اسید (ALA) بر آسیب ناشی از انجماد-ذوب سلول های بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs) موش نابالغ از طریق ارزیابی بیان ژن های دخیل در آپوپتوز بود. سلول های بنیادی اسپرماتوگونی از بیضه موش های ۴-۸ روزه نژاد C۵۷ جدا شده و پس از تایید هویت با روش های ایمونوسیتوشیمی (نشانگر PLZF) و سنجش فعالیت آلکالین فسفاتاز، به مدت سه هفته کشت داده شدند. سپس سلول ها در چهار گروه انجمادی شامل کنترل (بدون آنتی اکسیدان) و سه دوز ۲/۰، ۱ و ۵ میکرومولار آلفالیپوئیک اسید منجمد شدند. پس از ذوب، بیان ژن های Bax، Bcl۲، Casp۳ و Casp۹ با روش Real-time PCR بررسی گردید. نتایج نشان داد که غلظت ۱ میکرومولار ALA به طور معنی داری بیان ژن پروآپوپتوتیک Bax و نیز ژن های Casp۳ و Casp۹ را کاهش و بیان ژن ضد آپوپتوتیک BCL۲ را افزایش می دهد (۰۵/۰>P). غلظت ۲/۰ میکرومولار نیز کاهش معنی داری در بیان Bax و Casp۳ ایجاد کرد. بالاترین دوز (۵ میکرومولار) اثر معنی داری نداشت. میتوان نتیجه گرفت که آلفا لیپوئیک اسید، به ویژه در غلظت ۱ میکرومولار، با تعدیل بیان ژن های کلیدی آپوپتوز می تواند از سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موش در برابر آسیب ناشی از فرآیند انجماد-ذوب محافظت کند و به عنوان یک افزودنی موثر در محیط انجماد این سلول ها پیشنهاد می گردد.

کلیدواژه ها:

سلول های بنیادی اسپرماتوگونی ، آلفا لیپوئیک اسید ، انجماد ، آپوپتوز ، بیان ژن ، موش