ارزیابی اثر بیان ژن sT پولیوماویروس مرکل سل در میزان بیان ماتریکس متالوپروتئیناز ۱ در کارسینومای سلول های سنگفرشی در سرطان دهانه رحم آلوده با پاپیلوماویروس پرخطر انسانی تیپ ۱۶: پیامدهای متاستاز

مقدمه: عفونت هم زمان ویروس های پاپیلومای انسانی پرخطر (HR-HPV) با پولیوماویروس های انسانی مانند مرکل سل ویروس (MCPyV)، می تواند نشان دهنده اثر سینرژیک احتمالی باشد. این تحقیق بر نقش پروتئین sT پولیوماویروس مرکل سل (MCPyV sT) متمرکز است که در ایجاد اختلال در مکانیسم های تنظیمی سلولی، با آنکوپروتئین های HPV شباهت هایی دارد. این مطالعه با هدف بررسی اثر آنکوژن MCPyV sT در میزان بیان ژن ماتریکس متالوپروتئیناز-۱ MMP-۱)) در سلول های Ca Ski آلوده با ویروس HPV-۱۶ انجام شد. روش کار: ژن MCPyV sT ابتدا در وکتور PUC۵۷ و پس از تکثیر با PCR، در وکتور بیانی PCMV۶ کلون شد. برای تایید از روش کلونی PCR و هضم آنزیمی و روش توالی یابی سنگر استفاده شد. وکتور PCMV۶-sT در داخل سلول های Ca Ski ترانسفکت شد. کارایی ترانسفکشن از طریق میکروسکوپ فلورسنت و فلوسایتومتری بررسی شد. بیان mRNA sT و تاثیر آن در بیان MMP-۱، با روش RT-qPCR بررسی شد. یافته ها: بیان بالای ژن sT در سلول های ترانسفکت شده با پلاسمید PCMV۶-sT مشاهده شد. ترانسفکشن PCMV۶-sT در سلول های آلوده به HPV-۱۶، در مقایسه با گروه های کنترل و mock، به افزایش معنی دار بیان ژن MMP-۱ در ۴۸ ساعت (۰۵/۰P<) و ۷۲ ساعت (۰۱/۰P<) پس از ترانسفکشن منجر شد. نتیجه گیری: MCPyV sT سبب افزایش بیان MMP-۱ به عنوان نشانگر شاخص فرایندهای تهاجم و متاستاز می شود که این موضوع بر اهمیت تعامل بین آنکوپروتئین های ویروس های مختلف در سلول های سرطانی تاکید می کند.

کلیدواژه ها:

Apoptosis ، Ca Ski ، HPV۱۶ ، MCPyV ، MMP-۱ ، sT Ag ، مرکل سل پولیوماویروس ، آنتی ژن sT ، پاپیلوماویروس انسانی تایپ ۱۶ ، آپوپتوز ، MMP-۱ ، سلول های Ca Ski