جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری‎های مولد لیپاز از پساب کارخانه فرآورده های گوشتی گل بهار خرم آباد

مقدمه: لیپازها، به دلیل توانایی زیست کاتالیزوری در محیط های آبی و غیرآبی یکی از مهم ترین کاتالیزورها برای صنایع مختلف مانند شوینده، لبنیات و نساجی به شمار می روند. غربال گری زیستگاه های مختلف برای شناسایی باکتری‎های مولد لیپاز و بهینه‎سازی پارامترهای فعالیت آن ها، تولید و استفاده موثر لیپازها را در صنایع مختلف تسهیل می کند. با توجه به اهمیت یافتن منابع جدید لیپاز، پژوهش حاضر با هدف جداسازی و شناسایی باکتری های مولد لیپاز و بررسی ویژگی های آن ها صورت گرفت. مواد و روش­ ها: در این مطالعه، نمونه پساب کارخانه فرآورده های گوشتی گل بهار خرم آباد از نظر وجود سویه های باکتریایی مولد لیپاز غربال گری گردید. جدایه‎های تولیدکننده لیپاز بر اساس خصوصیات مورفولوژیکی، بیوشیمیایی و توالی ژن  ۱۶S rRNAشناسایی شدند. پارامترهای محیط کشت مانند pH، دما و زمان به منظور بهینه‎سازی فعالیت لیپازی متفاوت بودند. یافته ­ها: در این مطالعه تعداد سه ایزوله با فعالیت لیپازی بالا در اثر غربال گری پساب کارخانه فرآورده های گوشتی گل بهار خرم آباد شناسایی شدند. ایزوله هایی که بیشترین فعالیت لیپازی را نشان داده بودند با استفاده از بلاست توالی نوکلئوتیدی به دست آمده برای ژن ۱۶S rRNA به عنوانBacillus amyloliquefaciens  شناسایی شدند. همچنین بیشترین میزان فعالیت آنزیم لیپاز برای ایزوله های شناسایی شده در ۴۸ ساعت ثبت شد. علاوه بر این، در این پژوهش مشخص شد که حداکثر فعالیت لیپازی در دمای ۴۵ درجه سانتی گراد و ۸ pH = صورت می گیرد. بحث و نتیجه­ گیری: بر اساس یافته های این مطالعه مشخص شد که لیپاز های خارج سلولی ایزوله های باکتری B. amyloliquefaciens از نوع لیپازهای قلیایی بوده و دارای پایداری دمایی نسبتا مناسبی هستند. با استخراج و تخلیص لیپاز خارج سلولی این ایزوله ها می توان از آن در صنایع مختلف بهره برد. همچنین با شناسایی و جداسازی ژن تولید کننده آنزیم لیپاز از ایزوله های مذکور می توان آن را در فرآیند مهندسی آنزیم وارد کرده و با ایجاد جهش های هدفمند، میزان فعالیت آن را به طور دلخواه تغییر داد.

کلیدواژه ها:

۱۶S rRNA ، Bacillus amyloliquefaciens ، Enzymatic activity ، Lipase ، فعالیت آنزیمی ، لیپاز ، Bacillus amyloliquefaciens ، ۱۶S rRNA  .