آنالیز بیوشیمیایی و آنتی اکسیدانی کافیئک اسید ریشه های مویین گیاه خرفه (Portulaca oleracea L.) تراریخته با آگروباکتریوم ریزوژنز

هدف: خرفه در طب سنتی بسیاری از کشورها استفاده می شود. ریشه خرفه حاوی ترکیبات ثانویه مفید و به مقدار بسیار کم هستند. هدف تحقیق حاضر بررسی کاربرد یکی از روش های زیست فناوری، به منظور افزایش تولید ترکیبات موثر دارویی با تولید ریشه های مویین می باشد.

مواد و روش ها: دانه های خرفه ضدعفونی شده کشت شدند، محور زیر لپه دانه رست ها با آگروباکتریوم ریزوژنز (جدایه های A۱۵ و A۴) تلقیح شدند. آزمایش های PCR (Polymerase Chain Reaction) برای تایید انتقال ژن انجام شدند. محور زیر لپه گیاهان تلقیح شده و شاهد (تلقیح نشده با باکتری) بر روی محیط کشت (Murashig & Skoog, ۱۹۶۲) MS جامد کشت داده شدند. وجود کافیئک اسید حاصل از گیاهان تراریخته و کنترل با آنالیزهای HPLC (High Performance Liquid Chromatography) و فعالیت آنتی اکسیدانی با آزمون DPPH (۲,۲-diphenyl-۱-picrylhydrazyl) مورد ارزیابی قرار گرفتند.

یافته ها: آزمایش های PCR حضور ژن rolB از جدایه های A۱۵ و A۴ را در خرفه تراریخته نسبت به کنترل (فاقد ژن rol) نشان دادند. پس از تشکیل کالوس، ریشه های مویین القاء شدند. وجود ریشه های مویین خرفه تراریخته در سطح احتمال %۵ معنی دار بودند. آنالیز HPLC بر وجود مقدار بیشتر کافئیک اسید در خرفه تراریخته را نسبت به شاهد تایید دارد، که ۳۴ درصد بالاتر بودند. فعالیت آنتی اکسیدانی خرفه تراریخته با جدایه A۴ ۷۳۷/۸۶ بودند که درصد بازدارندگی در غلظت پایین انجام شده است.

نتیجه گیری: ریشه های مویین خرفه تراریخته می توانند برای افزایش بازده تولید آلکالوییدهای کافئیک اسید در صنایع داروسازی قابل استفاده باشند.

کلیدواژه ها:

انتقال ژن ، خرفه ، ریشه مویین ، آنتی اکسیدان.