استفاده از روشی کارآمد برای جداسازی اسپرم های با تحرک کم و زیاد در منی تازه تیمار شده با Resiquimod (R۸۴۸) در نریان، با هدف جداسازی اسپرم های حامل کروموزوم X از Y

هدف از مطالعه حاضر تنظیم و بهینه سازی روشی کارآمد برای جداسازی اسپرم های کم تحرک و پرتحرک تیمار شده با Resiquimod (R۸۴۸) در اسب بود، با این هدف که بتوان از این روش در تولید اسپرم تعیین جنسیت شده در اسب استفاده کرد. در مطالعه حاضر، نمونه منی تازه از سه نریان متفاوت در سه تکرار اخذ شد. برای تعداد ۳۰ میلیون اسپرم، فرایند Swim-up در محیط HTF برای مدت زمان ۳۰ دقیقه انجام شد. در پایان، ۵ لایه ی مختلف، به ترتیب از بخش بالایی محیط به سمت پایین جداسازی شدند. چهار دز ۰۶/۰ (۰۶/۰D)، ۱۲/۰ (۱۲/۰D)، ۱۶/۰ (۱۶/۰D) و ۲۴/۰ (۲۴/۰D) میکرولیتر از Resiquimod با غلظت ۳ میکرومولار مورد آزمایش قرار گرفتند و با گروه های کنترل بدون Resiquimod از نظر شاخص های مختلف حرکتی اسپرم مقایسه شدند. دزهای ۱۲/۰D ، ۱۶/۰D و ۲۴/۰D سبب کاهش معنی دار در شاخص های مرتبط با سرعت حرکت اسپرم در اغلب لایه های برداشت شده شدند (۰۵/۰P<). برای دز ۱۶/۰D، شاخص VSL در لایه های B و C در گروه درمان نسبت به کنترل افزایش معنی دار نشان داد (۰۵/۰P<). همچنین دز ۱۶/۰D سبب کاهش معنی دار در شاخص های سرعت حرکت اسپرم در ۲ لایه پایینی شد (۰۵/۰P<). در بالاترین لایه برداشت شده در این دز، میزان VSL در گروه درمان بیش از گروه کنترل بود (۰۵/۰ P<) و ۲ شاخص VCL و VAP اختلاف معنی داری بین گروه های کنترل و درمان نداشتند (۰۵/۰P>). در مجموع بهترین دز استفاده شده در این مطالعه که منطقی ترین تغییرات را در شاخص های حرکتی اسپرم در لایه های برداشت شده داشت دز ۱۶/۰D بود.

کلیدواژه ها:

اسپرم اسب ، swim-up ، Resiquimod ، شاخص های حرکتی اسپرم