بررسی سمیت آنتی ژن SO۶-STxB بر روی رده سلولیMCF۷ در شرایط کشت دو بعدی

پروتئین های غیرفعال کننده ریبوزومی از جمله SO۶، به دلیل خواص شان در حوزه های زیست شناسی مولکولی و تحقیقات درمانی مورد توجه قرار گرفته اند. این پروتئین ها در گیاهانی نظیر صابونی (Saponaria officinalis) یافت شده و به واسطه ویژگی های منحصربه فرد، در طراحی درمان های هدفمند، به ویژه در درمان سرطان، کاربرد دارند. در این پژوهش، با هدف کاهش سمیت SO۶ و بهبود انتخاب پذیری آن برای سلول های سرطانی، این پروتئین با بخش B سم شیگا (STxB) ممزوج شد. ترانسفورماسیون وکتورpET-۲۸a(+)-SO۶-STxB در میزبان پروکاریوتی به کمک شوک حرارتی انجام گرفت. پس از صحت عمل ترانسفورم، ابتدا سلول های باکتریایی با IPTG القا شدند و سپس رسوب آن ها در PBS و اوره ۸ مولار حل شد و با امواج فراصوت دیواره باکتری شکسته شد. به واسطه کاغذ PVDF، وسترن بلاتینگ برای تایید پروتئین انجام گرفت. پروتئین استخراج شده جهت تخلیص از ستون کروماتوگرافی تمایلی نیکل (Ni-NTA) عبور داده شد. در انتها نیز تاثیر سمیت سلولی این پروتئین نوترکیب در رده سلولی MCF-۷ با آزمون MTT مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاکی از آن بود که ممزوج سازی SO۶ و STxB به طور قابل توجهی سمیت سلولی را کاهش داده است. این یافته ها بیانگر ظرفیت بالای پروتئین های کایمری برای استفاده در درمان های هدفمند سرطان و بهبود کارایی روش های زیست پزشکی است.

کلیدواژه ها:

پروتئین غیرفعال کننده ریبوزومی ، SO۶ ، STxB ، سمیت سلولی ، سرطان پستان