بررسی سمیت آنتی ژن ML۱-STxB بر روی رده سلولیMCF۷ در شرایط کشت دو بعدی

پروتئین های غیرفعال کننده ریبوزومی(RIPs)، مانند ML۱، به دلیل ویژگی های منحصربه فردشان، در تحقیقات درمانی و زیست شناسی مولکولی اهمیت بسیاری دارند. این پروتئین ها در گیاهانی نظیر دارواش (Viscum album L.) از خانواده Santalaceae وجود دارند و به دلیل عملکرد ویژه شان، نقش مهمی در درمان های هدفمند ایفا می کنند. این پژوهش با هدف بررسی کاهش سمیت ML۱ از طریق کایمر شدن با STxB انجام شد تا استراتژی های جدیدی برای درمان سرطان پستان طراحی گردد. در این مطالعه، وکتور pET-۲۸a(+)-ML۱-STxB در E. coli سویه BL۲۱(DE۳) به روش شوک حرارتی ترانسفورم شد. بیان پروتئین ML۱-STxB با القای IPTG ۱ میلی مولار صورت گرفت و با تکنیک سونیکاسیون، پروتئین استخراج گردید. تایید پروتئین به کمک وسترن بلاتینگ و کاغذ PVDF صورت گرفت. جهت خالص سازی پروتئین، تخلیص به روش کروماتوگرافی تمایلی نیکل (Ni-NTA) انجام شد. نهایتا اثر سمیت سلولی ترکیبات در رده سلولی MCF-۷ با استفاده از آزمون MTT بررسی گردید. نتایج نشان داد که کایمر شدن ML۱ با STxB موجب کاهش سمیت و رساندن آن به سطحی بی ضرر برای سلول ها شد. این یافته ها پتانسیل بالای پروتئین های کایمری را برای استفاده در درمان های هدفمند سرطان نشان می دهند و می توانند به عنوان ابزاری نوین در تحقیقات درمانی و زیست پزشکی مورد استفاده قرار گیرند.

کلیدواژه ها:

پروتئین غیرفعال کننده ریبوزومی ، ML۱ ، STxB ، سمیت سلولی ، سرطان پستان