بیان لوسیفراز باکتری Photorhabdus kayaii در اشرشیاکلی و بررسی خصوصیات آن

نشان دارکردن باکتریها با استفاده از آنزیم لوسیفراز، امکان مطالعه وضعیت آنها را در مدلهای حیوانی با تصویربرداری درون تنی فراهم میکند و روشی جهت بررسی کارایی واکسنها و فراورده های دارویی است . باکتریهای گونه Photorhabdus تنها نوع باکتریهای بیولومینسنت موجود در خشکی هستند که بیولومینسنس آنها ناشی از وجود آنزیم لوسیفراز است . هدف این مطالعه استفاده از لوسیفراز مذکور در نشاندارکردن باکتریها است . برای این منظور باکتری مذکور از همولنف حشره حامل آن ایزوله شد. با اندازه گیری سیگنال لومینسنس توسط Multi -Mode Reader بیولومنسنس بودن باکتری ایزوله شده تایید شد. بررسی توالی ژن ۱۶s rRNA در EZBioCloud نشان داد که باکتری ایزوله شده P. kayaii بوده است . کلونینگ اپرون lux این باکتری با بکارگیری وکتور pBBR۱MCS۲_START در اشرشیاکلی انجام شد. باکتری نوترکیب حاصل قادر به ساطع کردن سیگنال لومینسنس قوی بوده است . بعلاوه پس از تزریق داخل صفاقی آن به موش در دز ۷ ۱۰ * ۵,۲ سیگنال لومینسنس قوی در حفره شکمی موش قابل رویت بوده است . این نتایج نشان دهنده قابلیت لوسیفراز P. kayaii برای نشاندارکردن باکتریهای مورد استفاده در در مطالعات درون تنی است .

کلیدواژه ها:

لوسیفراز ، نشاندار ، Photorhabdus ، تصویربرداری ، درون تنی