بهینه سازی تولید آنزیم نوترکیب دارویی اورات اکسیداز در مقیاس صنعتی

آنزیم اورات اکسیداز نوترکیب میتواند برای درمان نقرس و سندرم لش نیهان و سایر بیماری های ناشی از هایپر اوریسمی ایفای نقش کند. این آنزیم قادر است اسید اوریک را به آلانتوئین تبدیل کند که به راحتی توسط کلیه ها دفع می شود. در این تحقیق برای تولید و بیان این پروتئین از یاکتری E.coli سویه ی BL۲۱ استفاده شد. این سویه ی مهندسی شده حاوی ژن اورات اکسیداز است که در محیط حاوی ۱۲g/l تریپتون و ۴ml/l گلیسرول و ۱۲/۵g/l نمک (K(۲)HPO(۴ و ۲/۳g/l نمک (KH(۲)PO(۴ داخل فرمانتور با حجم وسل ۳ لیتر کشت داده شد. در OD=۰/۶ القای لاکتوز با غلظت ۱/۴g/l انجام شد و بعد از ۵ ساعت از زمان القا، بایومس سانتریفیوژ و آنزیم مورد نظر به کمک ستون نیکل سفارز جداسازی و تخلیص شد. فعالیت آنزیم تولید شد ۰/۹۶U/ml بود.

کلیدواژه ها:

اورات اکسیداز ، فرمانتور ، هایپراوریسمی ، لاکتوز ، آنزیم نوترکیب