تنظیم افزایشی miR-۱۵۵ باعث القای توقف چرخه سلولی و آپوپتوز در لوسمی میلوئیدی مزمن می گردد

زمینه و هدف: بر اساس شواهد روزافزون، بیان غیر طبیعی microRNA ها با تومورزایی، گسترش تومور و عود در لوسمی ها، از جمله لوسمی میلوئید مزمن (CML) مرتبط هستند. در این مطالعه اثر بیان بیش از حد miR-۱۵۵ در سلول های K۵۶۲ بر توقف چرخه سلولی و القا آپوپتوز بررسی گردید. روش تحقیق: در این مطالعه بنیادی کاربردی، وکتورpLenti-III-pre miR-۱۵۵-GFP برای افزایش بیان miR-۱۵۵ در رده سلولی K۵۶۲ از طریق نوکلئوفکشن در مقایسه با وکتور pLenti-III - Backbone-GFP به عنوان گروه کنترل (Backbone) مورداستفاده گرفت. از فلوسایتومتری برای تایید بیان وکتور حاوی miR-۱۵۵ در سلول های آسیب دیده استفاده شد. پس از ترانسفکشن، میزان بیان miR-۱۵۵، BAX، BCL۲، CASP۳ و TP۵۳ با روش RT-qPCR اندازه گیری شد. در بررسی چرخه سلولی از رنگ پروپیدیوم یدید Propidium Iodide (PI) استفاده گردید و سلول های رنگ آمیزی شده توسط فلوسایتومتری قرائت شدند. اهمیت آماری نیز به عنوان مقدار P کمتر از ۰۵/۰تعریف شد. یافته ها: پس از تایید افزایش بیان miR-۱۵۵، هنگامی که سلول های ترانسفکت شده با miR-۱۵۵ با سلول های ترانسفکت شده با Backbone، شدند، توقف چرخه سلولی در گروه miR-۱۵۵ مشاهده شد. در سلول های با افزایش بیان miR-۱۵۵، تغییر در نسبت های G۰/S و G۱/S در مقایسه با Backbone به ترتیب به ۵/۷ و ۵/۴ نشان­داده شد. ۴۸ ساعت پس از ترانسفکشن، بیان ژن های TP۵۳، BAX و CASP۳ در گروه بیان کننده miR-۱۵۵ افزایش و بیان BCL۲ کاهش یافت. نتیجه گیری: افزایش سطح miR-۱۵۵ باعث توقف چرخه سلولی و افزایش سطح بیان ژن پرو آپوپتوز می شود که نشان می دهد miR-۱۵۵ رشد تومور را در CML مهار می کند.

کلیدواژه ها:

Apoptosis ، BAX ، BCL-۲ ، CASP۳ ، Cell cycle ، Chronic myelogenous leukemia ، microRNA-۱۵۵ ، TP۵۳ ، آپوپتوز ، BAX ، BCL-۲ ، CASP۳ ، چرخه سلولی ، لوسمی میلوژن مزمن ، microRNA-۱۵۵ ، TP۵۳