بررسی ایمنی زائی نانوذرات PLGA دربردارنده پروتئین اینتیمن از باکتری اشرشیاکلی انتروهموراژیک

مقدمه:سویه های بیماری زای اشرشیاکلی از عوامل شایع اسهال می باشد. باکتری انتروهموراژیک اشرشیاکلی((EHEC باعث اسهال و سندرم همولیتیک اورمیک در انسانها می شود . یکی از مهمترین مکانیسمهای بیماریزاییEHEC، اتصال به سلولهای اپیتلیالی روده در میزبان است. اینتمین در شروع چسبندگی EHEC به سلول میزبان مور نیاز است. با توجه به خطرات ناشی از درمان آنتی بیوتیکی در عفونت EHEC، واکسن ها روشی امید بخش برای پیشگیری از عفونت را ارائه می کنند. هدف از این مطالعه بررسی ایمنی زایی پروتئین نوترکیب Intimin بارگذاری شده در نانوذرات PLGA در برابر عفونت باکتریEHEC بود.مواد وروشها:در این مطالعه تحقیقی، بیان پروتئین نوترکیبIntimin، درE.coli BL۲۱ DE۳ با IPTG القا شد. پروتئین نوترکیب با وسترن بلات ارزیابی و کروماتوگرافی تمایلیNi-NTAتخلیص گردید. نانوذرات PLGAبه روش امولسیون دوگانه تهیه و خصوصیات ساختاری با SEMو DLSبررسی گردید. ایمنی زایی زیرپوستی موش ها انجام و تیترآنتی بادی ها توسط ELISAتعیین شد. موش ها با خوراندن باکتری بیماریزا و ریزش باکتری در موش ها بررسی گردید.یافته ها و نتیجه گیری :آنالیزSDS-PAGE بیان مناسبی از پروتئین نوترکیب را نشان داد. پروتئین نوترکیب توسط وسترن بلات تایید شد. ظرفیت بارگذاری پروتئین در نانوذرات PLGA، ۸۹ درصد بود. متوسط اندازه نانوذرات ۲۱۰ نانومتر بود. تیتر پایانی الیزا برای پاسخ هومورال به پروتئین بارگذاری شده ۱۲۸۰۰ بود. ریزش باکتری در موش های ایمن تا۱۰۴ cfu/ml کاهش یافت. نتایج نشان داد که پاس ایمنی علیه پروتئینIntiminبارگذاری شده در نانوذراتPLGAباعث حفاظت حیوان در چالش باEHECمی شود.

کلیدواژه ها:

، PLGA ، نانوذرات ، اشرشیاکلی انتروهموراژیک ، اینتیمین ، ایمنی زائی