ساخت و تولید cDNAی فاکتور رشد اندوتلیال عروقی111 (VEGF111) به صورت مصنوعی

فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) یک گلیکوپروتئین همودیمر با وزن مولکولی 45-34 کیلودالتون می‌باشد. VEGF یکی از مهمترین تنظیم‌کننده‌های اختصاصی رگ ‌زایی است و شامل هفت نوع گلیکوپروتئین ترشحی می‌باشد. VEGFA فاکتور اصلی در فرایند رگ‌زایی است. آنژیوژنز درحالت‌های فیزیولوژیک مثل چرخه تولیدمثل و بهبود زخم‌ها و همین طورحالت‌های پاتولوژیک مثل ایسکمی‌ها، دیابت، آرتریتروماتوئید و سرطان نقش دارد. به علاوه کلیه انواع VEGFها در تحقیقات مختلف سلول‌های بنیادی و regenerative medicine مورد استفاده قرار می‌گیرند. VEGF111 یکی از جدیدترین انواع ایزوفرم‌های VEGF-A بوده که توسط پلاسمین تجزیه نمی‌شود و نسبت به هضم پروتئولیتیکی توسط سرین‌پروتئازهایی مانند پلاسمین، مقاوم می‌باشد. ویژگی رگ‌زایی قوی در ایزوفرم VEGF111 و مقاومت نسبت به فرآیند پروتئولیز، آن را به عنوان کاندید مهمی در درمان ایسکمی‌ها مطرح نموده ‌است. ژن VEGF شامل هشت اگزون می‌باشد و در ایزوفرم VEGF111 توالی اگزون‌های 4-1 و 8 وجود دارد. در این مطالعه از طریق واکنش Soeing PCR به ساخت cDNAیVEGF111، مستقیماً از روی DNA ژنومی پرداخته شد و در واقع فرآیند پیرایش (splicing) به صورت مصنوعی و از طریق مهندسی ژنتیک انجام گردید. ساختار اینcDNA توسط سکوانسینگ تایید گردید. در آینده از طریق الحاق آن به وکتور مناسب و ترانسفورماسیون آن به باکتری E.coli این پروتئین نوترکیب تولید می‌گردد.

کلیدواژه ها:

، VEGF-A ، 111VEGF ، پلاسمین ، ایسکمی ، Soeing PCR