حفظ منابع ژنتیکی سوسن چلچراغ با نگهداری ژرمپلاسم در ازت مایع و استفاده از روشهای کپسوله کردن- آببرداری و کپسوله کردن - شیشه ای شدن

نگهداری ژرمپلاسم در دمای بسیار پائین ازت مایع (-196درجه سانتیگراد) روشی مناسب برای حفظ درازمدت منابع ژنتیکی گیاهی است. ژرمپلاسمهای سوسن چلچراغ [Lilium ledebourii (Baker) Bioss.] ( دانه ها، محورهای جنینی، جوانه های محوری و پیازچهها) با استفاده از روش کپسولهکردن-آببرداری و کپسولهکردن-شیشهایشدن، در ازت مایع نگهداری شدند. پیشتیمارهای مورد استفاده برای کاهش تنش ناشی از انجماد در ازت مایع، سوکروز، سوکروز-آببرداری،کپسوله کردن-آب- برداری و کپسولهکردن-شیشهایشدن بودند. از غلظت 0/75 مولار سوکروز، همچنین از جریان هوای تمیز اتاق کشت، به - مدت یک ساعت استفاده شد. ژرمپلاسمها با استفاده از آلژیناتسدیم ( 3 درصد) و کلریدکلسیم ( 100 میلی مولار )، کپسوله (پوششدار) شدند. ژرمپلاسمها همچنین در محلول شیشهایشدن گیاهی 2، با ترکیب 30 درصد (وزن به حجم) گلیسرول، 15 درصد (وزن به حجم) اتیلن گلیکول و 15 درصد (وزن به حجم) دی متیل سولفوکسایدشیشهای شدند. ژرمپلاسم ها بعد از قرارگرفتن در پیشتیمارها، بهمدت حداقل یک ساعت در ازت مایع غوطه ور شدند . بعد از نگهداری در ازت مایع، ژرم - پلاسمها برای ذوبشدن، بهمدت 2 دقیقه در حمام آب گرم با دمای 37-38 درجه سانتیگراد قرار گرفتند. سپس ژرم پلاسم ها در محیط جامد موراشیگ و اسکوگ کشت شدند. روش کپسولهکردن-آببرداری برای دانهها و روش کپسولهکردن-شیشهایشدن برای دانهها، محورهای جنینی، جوانههای محوری و پیازچهها مورد استفاده قرار گرفت. در روش کپسولهکردن-آببرداری، درصد بقای دانهها بعد از نگهداری در ازت مایع، برای دانه های شاهد، صفر، برای دانهه ای پیشتیمارشده با سوکروز و آ ببرداری، 75 درصد و برای دانه های کپسوله شده ی پیشت یمارشده با سوکروز و آب برداری ، 50 درصد بود . در روش کپسوله کردن - ، شیشهایشدن، حدود 10 درصد از دانهها و محورهای جنینی منجمدشده ی پیش تیمارشده با محلول شیشه ای شدنگیاهی 2، 0/75 مولار سوکروز و کپسولهشده، در محیط کشت، جوانه زدند، درحالیکه دانهها و محورهای جنینی شاهد و پیش تیمارشده با محلول شیشهایشدن گیاهی 2 ، 0/75 مولار سوکروز، بدون کپسول، بقایی را نشان ندادند. هیچیک از جوانههای محوری و پیازچههای شاهد و پیشتیمارشده با محلول شیشه ای شدن گیاهی 2، 0/75 مولار سوکروز و آب برداری، علائمی از رشد را نشان ندادند. نتایج این مطالعه نشان داد که، مناسبترین اندام گیاه سوسن چلچراغ برای نگهداری در ازت مایع، دانه، مناسب- ترین پیشتیمار، سوکروز-آببرداری و مناسبترین روش، کپسوله کردن است.