اثر هرسپتین نوترکیب بر رشد سلول های سرطانی پستان

زمینه و هدف: سرطان پستان یکی از شایع ترین انواع سرطان در میان زنان است . مولکول HER-۲ به عنوان گیرنده تیروزین کینازی از خانواده گیرنده های رشد عامل اپیدرمی، عامل اصلی سرطان است. مولکول پروتئینی هرسپتین که یک آنتی بادی ضد HER-۲ است؛ می تواند نقش مهمی در تشخیص و درمان سرطان پستان داشته باشد. این مطالعه به منظور ساب کلون کردن ژن هرسپتین و سپس بیان در سیستم پروکاریوتی (E.coli) و تولید هرسپتین نوترکیب به منظور استفاده در درمان سرطان پستان انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی ژن هرسپتین از سازه سنتزی با روش هضم آنزیمی جدا و درون وکتور بیانی pET۲۸a انتقال داده شد. زیر همسانه سازی ژن موردنظر با استفاده از PCR و هضم آنزمی تایید گردید. پس از انتقال وکتور نوترکیب به میزبان E.coli BL۲۱ DE۳ ، با استفاده از القاگر IPTG ژن نوترکیب هرسپتین بیان شد. پروتئین نوترکیب با استفاده از SDS-PAGE ارزیابی و تخلیص با ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی نیکل انجام شد و در نهایت توسط وسترن بلاتینگ با استفاده از آنتی بادی ضدهیستیدین تایید شد. میزان کشندگی و زنده ماندن سلول ها در مجاورت با هرسپتین نوترکیب با روش MTT بررسی شد. یافته ها: پس از ساب کلونینگ ژن هرسپتین، PCR و هضم آنزیمی، قطعه ۷۴۱ جفت بازی ژن هرسپتین را تایید کرد. بیان پروتئین نوترکیب هرسپتین و ارزیابی آن بر روی ژل SDS-PAGE اندازه حدود ۲۷ کیلودالتون را تایید کرد. پروتئین نوکیب با استفاده از آنتی هیستیدین نیز تایید شد. پروتئین خالص شده در مجاورت با لاین سلول SKBR۳ توانایی متوقف کننده رشد سلول های سرطانی را داشت. نتیجه گیری: با توجه به این که آنتی ژن HER۲ به وفور بر سطح سلول های سرطانی پستان بیان می شود؛ پروتئین هرسپتین می تواند به عنوان یک آنتی بادی بازدارنده عمل نموده و رشد سلول های سرطانی پستان را مهار کند.

کلیدواژه ها:

Breast cancer ، Recombinant Herceptin ، Her-۲ antigen ، Cancer cell ، سرطان پستان ، هرسپتین نوترکیب ، آنتی ژن her-۲ ، سلول سرطانی