اثر ملاتونین بر قطر کلونی ها، سطح آپوپتوزیس و بیان ژن های وابسته به آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند

هدف از اجرای این تحقیق بررسی اثر ملاتونین بر قطر کلونی ها، سطح آپوپتوزیس و بیان ژن های مرتبط با آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند بوده است. سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موجود در غشاء پایه لوله های منی ساز از بیضه گوسفند نژاد افشاری با استفاده از مراحل هضم آنزیمی جداسازی شدند. نمونه ها به چهار گروه تقسیم شدند. گروه شاهد شامل محیط پایه بود و در سه گروه بعدی به ترتیب تیمارهای H۲O۲ (۳۰ میکرومولار)، ملاتونین (۱ نانو مول) و ملاتونین+H۲O۲ (۳۰ میکرومولار H۲O۲ به همراه ۱ نانو مول ملاتونین) به محیط پایه اضافه شدند. سلول ها به مدت سه هفته کشت داده شدند و قطر کلونی ها در روزهای پنج و ۱۴ و ۲۱ پس از شروع کشت ارزیابی شدند. پس از پایان دوره کشت میزان آپوپتوزیس و بیان ژن های مرتبط با آپوپتوزیس (BAX و BCL۲) نیز ارزیابی شد. در روز ۵ و ۱۴ کشت، قطر کلونی های اسپرماتوگونی در گروه های شاهد و ملاتونین نسبت به دو گروه دیگر بیشتر بود (۰۵/۰≥P). در روز ۲۱ کشت، بیشترین و کمترین قطر کلونی های اسپرماتوگونی به ترتیب در گروه های ملاتونین و H۲O۲ مشاهده شد (۰۵/۰≥P). کمترین و بیشترین درصد سلول های آپوپتوتیک و همچنین بیان ژن BAX و مقدار نسبت BAX/BCL۲ به ترتیب در گروه های ملاتونین و H۲O۲ یافت شد (۰۵/۰≥P). همچنین بیشترین مقدار بیان ژن BCL۲ در سلول های اسپرماتوگونی گروه ملاتونین دیده شد (۰۵/۰≥P). در نتیجه استفاده از ملاتونین در محیط کشت می تواند روشی مفید در برای بهبود کیفیت و کاهش بروز آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند باشد.

کلیدواژه ها:

آپوپتوزیس ، اسپرماتوگونی ، کلونی زایی ، ملاتونین ، گوسفند