بررسی ژن های مهم پرتوانی و تمایزی در سلول بنیادین اسپرم ساز

در طول کشت سلول های بنیادی اسپرماتوگونیال ( SSCs ) و تبدیل آنها به سلول های بنیادی جنینی (شبه ES )، کلنی های انتقالی شبه ES و سلول های شبه اپی بلاست قابل مشاهده بودند. در مطالعه تجربی حاضر، ما با هدف تجزیه و تحلیل کارایی چند توان یا پتانسیل پرتوانی سلول های شبه ES ، کلنی های انتقالی و سلول های شبه اپی بلاست انجام شد. در این مطالعه تجربی، SSC ها از موش های گزارشگر فاکتور رونویسی ۴( Oct۴ ) -پروتئین فلورسنت سبز ( GFP ) تراریخته جدا شدند. در طی کشت سلولی، مستعمرات شبه ES ، انتقالی و اپی بلاست مانند خود به خود ایجاد شدند. بیان mRNA و پروتئین نشانگرهای پرتوانی به ترتیب توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز بلادرنگ Fluidigm (RT-PCR) و ایمونوسیتوشیمی تجزیه و تحلیل شد. کارایی تولید موش های کایمرا پس از تزریق سلول های ES و شبه ES به بلاستوسیست ها بررسی شد. تجزیه و تحلیل های میکروسکو پی نشان داد که بیان Oct۴-GFP در سلول های شبه ES بسیار قوی بود، در سلول های شبه اپی بلاست قابل تشخیص نبود و تنها در کلنی های انتقالی جزئی بود. Fluidigm RT-PCR بیان بالاتری از نشانگرهای سلول زایای Stra-۸ و Gpr- ۱۲۵ را در سلول های شبه ES و ژن های پرتوانی Dppa۵ ، Lin۲۸ ، Klf۴ ، Gdf۳ و Tdgf۱ در کلنی های شبه ES و سلول های بنیادی جنینی ( ESCs ) نشان داد. در مقایسه با مستعمرات اپیبلاست مانند و انتقالی. هیچ بیان معنی داری از Oct-۴ ، Nanog ، Sox۲ و c-Myc در گروه های مختلف مشاهده نشد. ما سطح بیان بالایی از Nanog و Klf۴ را در ES مانند نشان دادیم، در حالی که تنها یک بیان جزئی در کلنی های انتقالی مشاهده شد. ما موش های کایمریک را پس از تزریق بلاستوسیستیک از سلول های ES و شبه ES تولید کردیم، اما نه از کلنی های انتقالی. ما مشاهده کردیم که کارایی تولید موش های کایمر یک در سلول های ES کارآمدتر ( ۵۹ ٪) در مقایسه با سلول های شبه ES (۲۲ ٪) بود. داده های جدید اطلاعات بیشتری در مورد پتانسیل های پرتوانی یا چندتوانی سلول های شبه ES مشتق از بیضه در مقایسه با کلنی های انتقالی و سلول های شبه اپی بلاست فراهم می کند.

کلیدواژه ها:

سلول بنیادین اسپرم ساز ، اسپرم سازی ، فلوسایتومتری ، سلول های بنیادی جنین ی ، لوله های اسپرم ساز