تولید آنتی ژن پلی اپی توپی نوترکیب HPV۱۶-E۶: بررسی اثر سویه ها و شرایط محیطی متفاوت

مقدمه: سرطان دهانه رحم با حدود ۵۲۸۰۰۰ مورد بیمار و ۲۶۶۰۰۰ مرگ در سال، یکی از سرطان های رایج در بین زنان جهان به شمار می رود و عفونت پایدار با ویروس پاپیلومای انسانی ((HPV عامل اصلی آن است. واکسن های مبتنی بر پپتید مشتق شده از دو پروتئین انکوژن E۶ و E۷ به علت ایمنی و پایداری بالا و سهولت در تولید، پتانسیل بالایی برای تولید واکسن درمانی HPV نشان داده اند. در این مطالعه اثر سویه های مختلف اشرشیاکلی در کنار پارامترهای محیطی ازجمله دما، زمان القایی و غلظت القاکننده بر میزان بیان پروتئین پلی اپی توپ نوترکیبHPV۱۶-E۶  بررسی می شود. مواد و روشها: در این مطالعه ژن بهینه شده پروتئین نوترکیب E۶، در درون وکتور دارای پروموتور T۷ کلون شد. وکتور نوترکیب به سویه های اشرشیاکلی BL۲۱(DE۳)، BL۲۱(DE۳)-AI، Rosetta، C۴۱(DE۳) و BL۲۱(DE۳)-pLysS ترانسفورم شد و توانایی این سویه ها برای بیان پروتئین نوترکیب مدنظر در شرایط مختلف محیطی مقایسه شد. بیان پروتئین نوترکیب E۶ در سویه های ذکرشده، در دو دمای ۲۵ و ۳۷ درجه سانتی گراد و غلظت های ۰/۱ و ۱/۰ میلی مولار از IPTG و زمان های مختلف انکوباسیون بررسی شدند. نتایج: پس از انجام بهینه سازی بیان، شرایط بهینه برای بیان پروتئین نوترکیب E۶ به دست آمد. بیشترین میزان بیان در سویه اشرشیاکلی BL۲۱(DE۳)-AI و در شرایط Optical Density (OD)=۰.۹، غلظت ۱/۰ میلی مولار IPTG و مدت زمان القای ۱۶ ساعت در دمای ۲۵ درجه سانتی گراد به دست آمد. بحث و نتیجهگیری: نتایج به دست آمده از این مطالعه می توانند برای تولید پروتئین E۶، به عنوان کاندید واکسن درمانی در درمان سرطان های مرتبط با HPV استفاده شوند.

کلیدواژه ها:

اشرشیا کلی ، پروتئین نوترکیب ، پروتئین HPV۱۶-E۶ ، بهینه سازی بیان