بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی سویه (DE۳) BL۲۱

سابقه وهدف: آلبومین سرم انسان از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد . این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها ومتابولیت ها در بدن بوده و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها موثر می باشد. چون تهیه آن از پلاسمای خون پرهزینه بوده و همراه با آلودگی به پاتوژن ها ی مختلف است، تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری به نظر می رسد مواد و روش ها: ژن آلبومین سرم انسان ( HSA ) براساس توالی موجود در بانک ژن سنتز شد و بعد از کلون در وکتور pET۲۲b به سلول پذیرای BL۲۱ (DE۳) انتقال یافت .کلنی حاوی پلاسمید نوترکیب، کشت داده شد و هنگامی که به ۶/۰ = ۶۰۰ OD رسید، با mM ۵/۱ IPTG القا شد. سپس در ساعات مختلف رسوب گیری انجام شد و روی ژل ۱۰% SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت . تولید پروتئین با روش وسترن بلات تائید گردید و تخلیص پروتئین توسط کروماتوگرافی تمایلی انجام شد. یافته ها: دراین مطالعه آلبومین انسانی در فضای پری پلاسمیک باکتری تولید شد. بیشترین میزان پروتئین نوترکیب تولید شده ، ۲۴ ساعت پس از القاء بو . نتیجه گیری: در این مطالعه آلبومین انسانی به صورت نوترکیب در اشرشیا کلی تولید شد.

کلیدواژه ها:

Human serum Albumin ، BL۲۱ ) DE۳ ( ، pET۲۲b ، آلبومین سرم انسانی ، ( DE۳ ) BL۲۱ ، pET۲۲b