واکنش ژنوتیپ های سویای دارای آلل های ژن مقاومت (Rsv۱) به آلودگی با سه سویه از ویروس موزائیک سویا

ژن های مقاومت گیاه (R)، شناسایی هشدارهای (Signals) غیر بیماری زایی (Avirulent) مربوط به بیمارگرها را که منجر به فعال سازی پاسخ های دفاعی گیاه می شوند، برعهده دارند. از مدت ها پیش تصور بر این است که تحت فشار انتخاب، نرخ موتاسیون بالای ویروس های دارای ژنوم آران ای (RNA)، به همراه اندازه بزرگ جمعیت و فاصله کوتاه تولید نسل، باعث ظهور جهش یافته هایی (Mutants) از عوامل بیماری زا می شود که قادرند از شناسایی به وسیله ژن های R میزبان فرار کنند. در این مطالعه، پاتوسیستم Soybean mosaic virus (SMV) /Rsv۱ برای شناسایی این فرضیه بکار برده شد. ژنوتیپ های سویای دارای آلل های مقاومتRsv۱ با عصاره دارای نتاج ویروسی همسانه عفونی سویه های N، G۷ و G۷d ویروس موزائیک سویا روی گیاهان سویای حساس، مایه زنی شدند. بعد از گذشت بیست و یک روز از مایه زنی، گیاهان فاقد علایم ویروسی توسط آزمون الیزای غیرمستقیم (Indirect ELISA) بررسی شدند. یکی از ده گیاه York و Kwanggyo و دو گیاه از سی گیاه Ogden مایه زنی شده با عصاره دارای نتاج ویروسی به دست آمده از تکثیر مولکول دی ان ای مکمل (cDNA) سویه N ویروس موزائیک سویا روی گیاهان سویای حساس که در آزمایشگاه همسانه سازی شده بود (molecularly cloned SMV-N یا pSMV-N)، علایم ویروسی را نشان دادند و در آزمون الایزای غیر مستقیم، مثبت بودند. در مایه زنی مکانیکی انجام شده با استفاده از عصاره به دست آمده از این گیاهان، مجددا ویروس به گیاهان York، Kwanggyo و Ogden منتقل شده و توانست با این گیاهان سازگار شود. بعد از انجام آزمون آرتی پی سی آر (RT-PCR) و پی سی آر آشیانه ای (Nested PCR) و تعیین ترادف طول کامل سیسترون های HC-Pro (Helper Component-Protease) و P۳ ویروس، موقعیت جهش نقطه ای ایجادشده و اسیدآمینه رمز شده در اثر تغییر نوکلئوتید در نقطه جهش، با استفاده از نرم افزار MEGA۷ مشخص شد. در گیاهان York و Kwanggyo، جهش نقطه ای در سیسترون HC-Pro و به ترتیب در موقعیت های نوکلئوتیدی ۱۱۳۸T و ۱۲۱۰A و در گیاه Ogden، در سیسترون P۳ ویروس و در موقعیت نوکلئوتیدی ۳۰۷۹A مشاهده شد.

کلیدواژه ها:

جهش نقطه ای ، ژن مقاومت Rsv۱ ، سویا ، ویروس موزائیک سویا