مقایسه تیتر آنتی بادی تولید شده بر علیه پروتئین های نوترکیب BLF۱ و BLF۱-STxB در رت های آزمایشگاهی

باکتری بورخولدریا­سودومالئی عامل بیماری میلوئیدوزیس و باکتری شیگلا­دیسانتری شایع ­ترین عامل اسهال است و تاکنون هیچ واکسن موثری علیه این دو باکتری تولید نشده است. پروتئین BLF۱ باکتری بورخولدریا سودومالئی نقش مهمی در ایجاد بیماری ­زایی و عفونت دارد. STxB شیگلا­دیسانتری یکی از فاکتورهای مهم در بیماری ­زایی است و هم چنین دارای نقش یاوری و حاملی است. ترکیب پروتئین BLF۱ با STxB می ­تواند کاندیدای مناسبی برای واکسن باشد. در این مطالعه تیتر آنتی ­بادی پروتئین ­های BLF۱-STxB وBLF۱ در رت با یکدیگر مقایسه شد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی وکتورهای pET۲۸a(+)-blf۱-stxB  و pET۲۸a(+)-blf۱ به باکتری BL۲۱(DE۳) E. coli تراریخت و توسط PCR تایید شدند. بیان ژن ­های blf۱-stxB و blf۱ تحت القای Isopropyl-β-D-thiogalactoside انجام و بعد از تخلیص پروتئین با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی، پروتئین ­های حاصل در چهار نوبت به رت تزریق شد. آنتی بادی پلی کلونال تولید شده در سرم رت ­ها اندازه گیری شد. یافته ­های پژوهش: پروتئین ­های نوترکیب تولید شده به وسیله SDS-PAGE و لکه ­گذاری وسترن مورد تایید قرار گرفتند. نتایج الایزا نشان داد که آنتی ­بادی علیه آنتی ژن BLF۱ تولید شده و با ترکیب STxB با BLF۱ میزان تیتر آنتی بادی نسبت به تیتر آنتی بادی علیه آنتی ژن BLF۱ افزایش یافته است. بحث و نتیجه گیری: پروتئین BLF۱-STxB تیتر آنتی بادی بیشتری نسبت به BLF۱ داشت. به علت شباهت ساختاری زیر واحد STxB با همتای آن در باکتری اشرشیاکلی می ­تواند کاندیدای واکسن علیه بورخولدریا سودومالئی، شیگلا دیسانتری، باکتری اشرشیاکلی انتروهموراژیک(EHEC) و اشرشیا انترو توکسینوژنیک(ETEC) باشد.

کلیدواژه ها:

Burkholderia pseudomallei ، Shigella dysenteriae ، Melioidosis ، BLF۱ ، STxB ، بورخولدریا سودومالئی ، شیگلا دیسانتری ، میلوئیدوزیس ، BLF۱ ، STxB