روش ساده و کارا برای جداسازی DNA ژنومیک از بافت های کهنه میگو ببری سبز( Penaeus semisulcatus)، مناسب برای PCR معکوس

انتخاب روش مناسب جهت استخراجDNA  سالم و دست نخورده از بافت هایی که مدت طولانی در الکل نگه داری شده اند، نقش مهمی در موفقیت آنالیزهای مولکولی دارد. هدف از این مطالعه، بهینه سازی یک روش ساده، تکرار پذیر، ایمن و قابل اعتماد جهت استخراج DNA ژنومیک با کیفیت از بافت های قدیمی ماهیچه ای میگو ببری سبز ( Penaeus semisulcatus ) بود. از مهم ترین مزایای این روش، پودر نمودن بافت در هاون چینی پس از خشک کردن در درجه حرارت ۴۰ درجه سانتی گراد، عدم استفاده از نیتروژن مایع جهت پودر کردن بافت و کاهش زمان استخراج تا حدود ۵ ساعت بود. به دلیل این که موفقیت در واکنش PCR معکوس، به شدت وابسته به کیفیتDNA  الگو است، جداسازی بخشی از ژن بتا اکتین با استفاده از این واکنش، جهت ارزیابی کیفیتDNA  استخراج شده، مورد توجه قرار گرفت. موفقیت در تکثیر و تعیین توالی بخشی از ژن بتا اکتین میگو ببری سبز، حاکی از آن است که DNA حاصل از این روش از کیفیت لازم جهت واکنش فوق برخوردار است. با توجه به موفقیت آمیز بودن واکنش PCR معکوس، DNA حاصل از این روش را می توان با موفقیت جهت انجام سایر مطالعات مولکولی از قبیل AFLP، RFLP و تکثیر قطعات بلند که نیازمند DNA با کیفیت است، به عنوان الگو مورد استفاده قرار داد.

کلیدواژه ها:

استخراج DNA ، بافت های قدیمی ، پودر کردن ، میگو ببری سبز