کاهش ظرفیت ترمیم کننده اوسیت شیمی درمانی شده با سیکلوفسفامید در تقابل با شکست DNA اسپرم

در سالهای اخیر، شکست DNA اسپرم به عنوان عاملی در تشخیص ناباروری مردان و تکنیک های کمک باروری (ART) در نظر گرفته شده است. اعتقاد بر این است که تخمک ها پس از لقاح و در مرحله جنینی نقشی اساسی در ترمیم قطعه قطعه شدن DNA اسپرم دارند. در این مطالعه، توانایی تخمک موشهای پس از شیمی درمانی در ترمیم شکست DNA اسپرم بررسی شد. مدل های حیوانی شکست DNA با ایجاد استرس اکسیداتیو در اسپرم و آسیب تخمک ها توسط داروی شیمی درمانی سیکلوفسفامید ایجاد می شود، هدف ما بررسی نقش تخمک ها در ترمیم شکست DNA اسپرم با بررسی بیان ژن های ترمیم کنندهRad۵۱ DNA، Brca۱، Mre۱۱a و Xrcc۴ در رویان های حاصل در دو مرحله (زیگوت و بلاستوسیست) می باشد. شکستگی DNA اسپرم در موشهای نر FVB / N با تزرق TBHP (هیدروپراکسید ترت بوتیل) ایجاد شد که باعث استرس اکسیداتیو می شود. دوز ۰,۲-۰,۱ LD۵۰ TBHP برای القای تکه تکه شدن DNA در موش های نر بالغ ۸-۶) هفته سن) به مدت دو هفته در نظر گرفته شد.در مدل سازی موش های ماده با شیمی درمانی سیکلوفسفامید، پس از تزریق دوزهای مختلف و بررسی بافتی بافت تخمدان و شمارش فولیکولار، دوز ۶۰ میلی گرم بر کیلوگرم سیکلوفسفامید انتخاب شد. پس از تزریق تک دوز سیکلوفسفامید و دو هفته بهبودی و اولین مشاهده سیکل جنسی، جفت گیری بین موش های نر و ماده در گروه های مختلف انجام شد. در نهایت، جمعیت زیگوت و بلاستوسیست به ترتیب ۱۲ ساعت و ۴ روز پس از مشاهده پلاک واژن، انجام شد. بیان DNA دو رشته ای ژن های شکست DNA اسپرم را شامل Brca۱، Mre۱۱a، Xrcc۴ و Rad۵۱ با Real time PCR ارزیابی کرد. داده های حاصل از مطالعه ژن های شکست دو رشته ای ترمیم DNA بیانگر افزایش بیان در جنین های زیگوت حاصل از جفت گیری موش های دارای اسپرم دارای شکست DNA و موش ماده تحت درمان با ماده شیمی درمانی است، در حالی که در مرحله بلاستوسیست کاهش بیان در ژن های شکست ذکر شده را مشاهده کردیم. اسپرم آسیب دیده در گروه ها فعالیت ترمیم ژن ها خواه تخمک سالم باشد یا آسیب دیده افزایش می یابد. به نظر می رسد رونوشت های اولیه تخمک ها در ترمیم تکه تکه شدن DNA اسپرم نقش موثری دارد ، اما تخمک ها پس از شیمی درمانی نه تنها توانایی خود را برای ترمیم آسیب های خود بلکه از بین بردن آسیب اسپرم ها را نیز از دست می دهند.

کلیدواژه ها:

شکست DNA اسپرم ، شیمی درمانی ، سیکلوفسفامید ، استرس اکسیداتیو ، ترمیم DNA