کاربرد طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر به منظور بهینه سازی تولید آنزیم آلکالین پروتئاز خارج سلولی توسط سویه جداسازی شده جدید باسیلوس پسودوفیرموس MSB۴
سال انتشار: 1395
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 384
فایل این مقاله در 16 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_BJM-5-20_003
تاریخ نمایه سازی: 12 اردیبهشت 1400
چکیده مقاله:
مقدمه: پروتئازهای قلیایی خارج سلولی با منشا میکروبی، یکی از مهمترین آنزیمهای صنعتی بوده که کاربردهای فراوان در صنایع مختلف دارند. در این مطالعه، تولید پروتئاز قلیایی باکتری باسیلوس پسودوفیرموس MSB۴ با استفاده از روششناسی سطح پاسخ افزایش یافت. مواد و روشها: چهار متغیر مستقل موثر، بر اساس نتایج به دست آمده از روش تک عاملی (غلظت زایلوز، غلظت عصاره گوشت، pH و دمای انکوباسیون)، به منظور تجزیه و تحلیل الگوی پاسخ و ساخت مدل با استفاده از روش طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر انتخاب شدند. طراحی آزمایش، شامل ۳۰ آزمایش دارای ۴ تکرار در نقطه مرکزی می شد و هر متغیر در ۵ سطح مختلف بررسی شد. به علاوه حضور ژنهای پروتئازهای قلیایی خارج سلولی در سویه MSB۴ با استفاده از PCR ارزیابی شد. نتایج: حداکثر مقدار تولید آنزیم (U/ml ۳۹۷/۱۸۵) که حدود ۲/۲ برابر بیشتر از روش تک عاملی و ۷/۳ برابر بیشتر از شرایط غیر بهینه است، بر طبق نتایج طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر با استفاده از ۳ درصد عصاره گوشت، اسیدیته ۹ و دمای ۳۷ درجه سانتیگراد به دست آمد. همچنین ژن های sub I, II و apr با سایز مورد انتظار (به ترتیب با ۳۱۹، ۴۸۶ و ۱۹۴ زوج باز) مسوول متالوپروتئاز و سرین پروتئاز قلیایی خارج سلولی در سویه MSB۴ با استفاده از PCR تشخیص داده شدند. بحث و نتیجهگیری: نتایج آزمایشگاهی به خوبی با مدل به دست آمده سازگاری دارند (۹۹۸۲/۰ Adj R۲:) و این مدل توانایی زیادی برای پیش بینی متغیر پاسخ برای مشاهدات جدید خواهد داشت (۹۹۶۷/۰Pred R۲: ). نتایج این مطالعه نشان داد که روش تک عاملی و سطح پاسخ به ترتیب روش مفیدی برای غربالگری و بهینهسازی تولید پروتئاز در سویه MSB۴ بودند
کلیدواژه ها:
باسیلوس پسودوفیرموس MSB۴ ، پروتئاز قلیایی ، روش تک عاملی ، روششناسی سطح پاسخ ، طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر
نویسندگان
ماتیا سادات برهانی
دانشجوی دکترای میکروبیولوژی، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران
زهرا اعتمادی فر
دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران
عیسی جرجانی
استادیار ژنتیک، دانشگاه گنبد کاووس، گلستان، ایران
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :