همسانه سازی تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی درون وکتور pET28a(+) و انتقال آن به باکتری اشریشیاکلی سویه DH5α
سال انتشار: 1395
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 272
فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
این مقاله در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NCMBJ-6-22_002
تاریخ نمایه سازی: 19 اسفند 1399
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: پوشش گلیکوپروتئینی E2 ویروس هپاتیت سی برای ورود ویروس به سلول های میزبان مورد نیاز است، همچنین به دلیل اختلاف توالی نوکلئوتیدی در ناحیه C ترمینال ژن E2 تنوع ویروسی به وجود می آید که موجب پایداری عفونت می گردد، در نتیجه این ژن هدف اصلی برای تولید آنتی بادی های خنثی کننده و ساخت واکسن می باشد. در این تحقیق نیز جهت مطالعات مقدماتی، تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی درون وکتورpET28a(+) قرار گرفته و به درون باکتری E-coli انتقال یافته است.
مواد و روش ها: ژن ناحیه E2 از ژنوتیپ2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی پس از طراحی پرایمرهای دارای جایگاه آنزیم های محدودگر EcoR1 و Nde1 توسط واکنش PCR تکثیر گردید و محصول آن پس از تائید درون وکتورpET28a(+) نوترکیب گشت، سپس به روش شوک حرارتی درون سلول باکتری E-coli سویه DH5α، ترانسفورم شده و تائید گردید.
یافته ها: همسانه سازی ژن E2 به صورت تمام طول درون وکتورpET28a(+) با موفقیت انجام شد و سازه نوترکیب (pET28a – E2) به درون سلول باکتریE-coli DH5α منتقل شده و تائید گردید.
نتیجه گیری: ساخت وکتور نوترکیب pET28a(+) دارای ناحیه تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی و انتقال به درون باکتری E-coli این امکان را فراهم می کند تا جهت بیان ژن مزبور در سویه های بیانی از این وکتور نوترکیب استفاده شود.
کلیدواژه ها:
Hepatitis C Virus ، E2 gene full-length ، genotype 2a (JFH1) ، pET28a (+) vector ، E-coli (DH5α). ، ویروس هپاتیت سی ، تمام طول ژن E2 ، ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ، وکتورpET28a(+) ، باکتری E- coli.
نویسندگان
سارا باقری
Biology Group, Payameh Nour University, Tehran, Iran.
پونه رحیمی
Department of Hepatitis and AIDS, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran.
روح الاه وهاب پور
Department of Hepatitis and AIDS, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran.
سید مهدی سادات
Department of Hepatitis and AIDS, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran.
محمدرضا آقا صادقی
Department of Hepatitis and AIDS, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran.
فاطمه متولی
Department of Hepatitis and AIDS, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran.