طراحی و بهینهسازی سیستم الایزای نقطهای (Dot-blot ELISA) با آنتیژنهای اختصاصی برای تشخیص ساده و سریع مشمشه
سال انتشار: 1398
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 291
فایل این مقاله در 8 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NUMS-7-2_002
تاریخ نمایه سازی: 3 اسفند 1399
چکیده مقاله:
مقدمه
مشمشه از قدیمیترین بیماریهای واگیر خطرناک و مشترک بین انسان و حیوان است که با ظهور جراحات گرانولوماتوزی قرحهای در پوست و غشاهای مخاطی مشخص میشود. با توجه به گزارش حتی یک مورد بیماری و لزوم جلوگیری از انتشار آن با شناسایی و معدومسازی میزبانهای آلوده، شناسایی زودهنگام بیماری با روشهای حائز حساسیت و ویژگی قابل قبول، از اهمیت بالایی برخوردار است. مطالعۀ حاضر به منظور طراحی و بهینهسازی سیستم الایزای نقطهای (Dot-blot ELISA) با آنتیژنهای اختصاصی جهت تشخیص ساده و سریع مشمشه در نمونههای سرمی اسبسانان انجام گرفت.
مواد و روشها
سویههای بورخولدریا مالئی در محیط مایع نوترینت همراه با گلیسیرول 4 درصد کشت داده شدند. آنتیژنهای کل سلول باکتری با استفاده از روش سونیکاسیون و ترسیب با تریکلرو استیک اسید (TCA) استخراج شد. غلظت بهینه آنتیژن-آنتیبادی با روش تیتراسیون چکر بورد معین شد. آنتیژن باکتری روی کاغذ نیتروسلولز مفروش و بعد از متوقفسازی با شیرخشک، سرم حیوان مشکوک و سپس آنتیبادی کونژوگه شده با HRP اضافه گردید و با استفاده از سوبسترای TMB، سیگنالها رهگیری شد.
یافتهها
تعداد 4 نمونه از 90 نمونۀ سرم با استفاده از آزمون الایزای نقطهای، مثبت گزارش شد. ویژگی و حساسیت آزمون، بهترتیب 96/62 و 100 درصد برآورد گردید. کشت و جداسازی بورخولدریا مالئی از نمونههای بالینی حیوان، اعتبار تست را تایید کرد.
نتیجهگیری
یافتهها نشان داد روش الایزای نقطهای حائز حساسیت، ویژگی و دقت بالا در تشخیص مشمشه بوده و به دلیل سرعت، سهولت تفسیر بدون نیاز به ابزار خاص، مقرون بهصرفه بودن و قابلیت کاربردی صحرایی آن، روش کاربردی و کارآمد میباشد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
سجاد یزدان ستاد
Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
نادر مصوری
Department of Tuberculin & Mallein, Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
کیوان تدین
Department of Veterinary Aerobic Bacteria Vaccines, Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
ایرج مهرگان
Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :