بیان پروتئین پوششی نوترکیب ویروس X سیب زمینی در باکتری Escherichia coli
محل انتشار: فصلنامه بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره: 11، شماره: 4
سال انتشار: 1398
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 530
فایل این مقاله در 18 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JOAGK-11-4_010
تاریخ نمایه سازی: 18 فروردین 1399
چکیده مقاله:
اهداف: ویروس X سیب زمینی (PVX) از خانواده Alphaflexiviridaeو جنس Potexvirus یکی از رایجترین و گستردهترین ویروسهای آلودهکننده سیب زمینی در جهان میباشد. بهدلیل گسترش و خسارت اقتصادی این ویروس در ایران، شناسایی و ردیابی آن با استفاده از روشهای با صرفهتر ضروری میباشد. تولید آنتیبادی چندهمسانهای با استفاده از فناوری دی ان ای نوترکیب، یک راهکار مفید برای تسهیل شناسایی این ویروس در طبیعت میباشد.
مواد و روشها: براین اساس، در بررسی حاضر، یک نمونه سیب زمینی آلوده به PVX از مزارع سیب زمینی در زرند، استان کرمان جمع آوری و آلودگی آن نسبت به ویروس مذکورتوسط آزمون DAS-ELISA تایید گردید. جدایه مذکور جهت تکثیر، بر روی توتون (Nicotiana glutinosa) مایه زنی گردید. پس از استخراج آر ان ای از گیاه آزمون، با استفاده از واکنش RT-PCR و آغازگرهای اختصاصی حاوی جایگاه برش برای آنزیمهای برشی، توالی پروتئین پوششی ویروس تکثیر و در ناقل بیان پروکاریوتی (pQE60) همسانهسازی گردید. پلاسمید نوترکیب، به باکتری Escherichia coli سویه M15، منتقل شد.
نتایج: پس از القای بیان، پروتئین مورد نظر استخراج و با تکنیک SDS-PAGE در ژل پلی آکریلامید 5/12 % مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل بیانگر آن است که وزن مولکولی باند حاصله در آزمون SDS-PAGE با وزن مولکولی پروتئین پوششی (kDa 24) مطابقت دارد. همچنین بیان پروتئین پوششی ویروس در تکنیک دات بلات نیز تایید گردید.
نتیجه گیری نهایی: در این تحقیق، یک آنتیژن نوترکیب مناسب جهت تشخیص ویروس X سیب زمینی تهیه گردید که بهخوبی توسط آنتیسرم تولید شده از طریق تزریق پیکرههای کامل ویروس به خرگوش در آزمون دات بلات شناسایی شد. تولید آنتیبادی چندهمسانهای با استفاده از آنتیژن ویروسی نوترکیب، گامی موثر در زمینه تسریع و تسهیل فرآیند شناسایی سرولوژیکی نمونههای آلوده به این ویروس مهم خواهد بود.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
حسین معصومی
کرمان کرمان، دانشگاه شهید باهنر، دانشکده کشاورزی، بخش گیاهپزشکی
پریسا حسن شیخی
گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان
جعفر ذوالعلی
استاد
اکبر حسینی پور
گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :