بررسی بیان پایدار فاکتور بیماریزای شیگلا سونیی، IpaB، در میزبان پروکاریوتی در شرایط بیان همزمان با عامل چپرونی IpgC

زمینه و هدف: شیگلا، یک باسیل گرم منفی متعلق به خانواده آنتروباکتریاسه است و موجب شیگلوزیس میشود که نوعی عفونت حاد رودهای است. برآورد میشود فقط در آسیا، سالانه 125 میلیون عفونت و 14000 مرگومیر ناشی از شیگلوز وجود دارد .شیگلا سونیی عامل اصلی اپیدمی در کشورهای درحالتوسعه است .IpaB فاکتور بیماریزای ضروری و چندمنظورهای در روند عفونت به شمار میرود. دستیابی به بیان پروتیین IpaB و انتقال پلاسمید حامل ژن IpaB به باکتری ضعیف شده، ساخت واکسن ژنی کارامد را علیه شیگلوز میسر میسازد. مواد و روش کار: ژنهای کدکننده IpaB و IpgC از ژنوم سویه شیگلا سونیی به روش PCR جدا شده و با هضم آنزیمی به داخل ناقل pBAD/myc-His B وارد شد. سپس به داخل میزبانهای کلونسازی و بیانی وارد شده و پس از تایید بیان، آنتیژنیسیته آن به روش لکهگذاری وسترن بررسی شد. یافته ها: ساخت سازواره های بیانی حامل ژن IpaB و بیان پروتیین IpaB صورت گرفت. همچنین بیان ژن ترانکیت IpaB در کنار دنباله هیستیدینی در غیاب ژن IpgC در باکتری E.Coli موید نقش چپرونی ژن IpgC بر بیان و پایداری IpaB است که میتواند استراتژی مناسبی در راستای بیان IpaB تلقی شود. نتیجه گیری: با توجه به اینکه تاکنون بیان IpaB در سیستمهای پروکاریوتی موفقیت آمیز نبوده است و در عین حال این پروتیین در رفتار تهاجمی باکتری نقشی محوری دارد؛ با بیان کنترلشده IpaB، امکان دستیابی به یک سویه تحت کنترل در مطالعات رفتارشناسی باکتری و نیز کاندید احتمالی برای تحریک سیستم ایمنی فراهم شد.

کلیدواژه ها:

شیگلا سونیی ، DNA ، IpgC ، IpaB نوترکیب ، چپرون