بررسی مرفولوژیکی و مولکولی (28S, rDNA) ایزوله های گوسفندی دیکروسلیوم در استان های شمالی و مرکز ایران

سابقه و هدف : دیکروسلیازیس بیماری انگلی کبدی است که دارای اهمیت بالینی و اقتصادی برای انسان و صنعت پرورش دام است. باتوجه به اهمیت بهداشتی و اقتصادی بیماری، در این مطالعه پارامترهای مرفومتریک و مولکولی ناحیه 28S rDNA ایزوله هایگوسفندی دیکروسلیوم در استان های شمالی و مرکزی ایران طی سالهای 90-1389 تعیین شده است. مواد و روش ها: در مجموع 200 ترماتوداز کبد گوسفندانی که به طور طبیعی در استانهای آذربایجان شرقی، خراسان رضوی، مازندران وتهران آلوده شده بودند، جمع آوری گردید. شاخص های مرفولوژیک کرم های بالغ بر اساس پارامترها ی مرفومتریک اندازه گیری شد. از این تعداد 60 نمونه برای بررسی های مولکولی انتخاب شدند . در ابتدا DNA انگل استخراج شده، سپس واکنش PCR برای تکثیر بخشی از ناحیه 28S صورت گرفت. با تکنیک RFLP و با استفاده از آنزیم محدودالاثر Tru1I گونه ی انگل تشخیص داده شد. در انتها از محصول خالص شده PCR، تعیین توالی صورت گرفت. نتایج: بر اساس شاخص قابل اعتماد مرفولوژیک موقعیت بیضه ها، تمام ایزوله ها، دارای دو بیضه پشت سرهم بودند. الکتروفورز محصولPCR در تمامی ایزوله های گوسفندی دیکروسلیوم باند 963bp نشان داد که شبیه موارد ثبت شده در بانک ژن بود . الگوی RFLP نشان دهنده ی 4 محل برش و تشکیل فراگمنت های 293bp ،145 bp ،116 bp و 409bp بود. گرچه اختلاف شاخص های مرفومتریک دراستان های مختلف معنی دار بود، ولی بررسی ژنومیک نشان دهنده ی وجود مشابهت بین توالی ها در استان های مورد برسی بود.نتیجه گیری: شاخص های مرفومتریک و مولکولی نشان دادند که دیکروسلیوم دندریتیکوم، تنها گونه ی مناطق شمال و مرکز ایران می باشد.

کلیدواژه ها:

دیکروسلیوم ، مرفولوژی ، تعیین توالی ، گوسفند ، RFLP ، rDNA ، 28S