اثبات بیماریزایی یک جدایه ی ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی از علف هرز عروسک پشت پرده و شناسایی چند میزبان وحشی ویروس از جنوب شرق ایران

ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی (Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV)، یکی از اعضای جنس Begomovirus و خانواده Geminiviridae است. در این تحقیق به منظور ساخت سازه ی عفونت زای ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی ژنوم مربوط به جدایه ی عروسک پشت پرده (G4) که از اطراف مزارع گوجه فرنگی واقع در جیرفت جمع آوری شده بودند، در ابتدا طول ژنوم کامل ویروس با استفاده از آنزیم فی 29 دیانای پلیمراز و به روش دایره ی غلطان تکثیر شد. نتایج حاصل از همسانه سازی و توالی یابی طول کامل ژنوم جدایه ی G4 نشان داد که توالی مربوطه 2756 نوکلئوتید طول دارد و بین %87/7 – 95/2 به جدایه ی TYLCV گزارششده از ایران، عمان و پاکستان شباهت دارد. در مرحله بعد، دو طول ژنوم کامل درون پلاسمید دوگانه ی pGreen قرار داده شد. سازه ی دوتایی ساخته شده در ابتدا به باکتری E. coli نژاد XL1-Blue و بعد به سلولهای Agrobacterium tumefaciens نژاد C58 انتقال یافت. سپس باکتری حاوی سازه ی عفونت زا به گیاهچه های گوجه فرنگی و عروسک پشت پرده مایه زنی شدند. بعد از گذشت 30 روز از زمان مایه زنی، گیاهان علائمی شامل پیچیدگی و کوچک شدن برگها، تورم رگبرگها، زرد شدن حدفاصل رگبرگها و کوتولگی گیاه را نشان دادند. آلودگی گیاهان مایه زنی شده با استفاده از آزمون پی سی آر به همراه آغازگرهای اختصاصی TLCBV-F-526 و TLCBV-R-1237 مورد تائید قرار گرفت. همچنین به منظور شناسایی سایر میزبانهای وحشی TYLCV، 44 نمونه ی گیاهی دارای علائم از اطراف مزارع گوجه فرنگی از جنوب شرق ایران جمع آوری گردید. نتایج به دست آمده نشان داد که علاوه بر گیاه عروسک پشت پرده (Physalis divaricata; Solanaceae)، آلودگی سه علف هرز دیگر بنامهای گل یکساعتی ( Hibiscus (trionum L; Malvaceae، گیاه وایه (Ammi majus L.; Apiaceae) و کرچک ( Ricinus communis L.; (Euphorbiaceae به TYLCV آلوده هستند.