شناسایی گونه Stagonosporopsis dorenboschii به عنوان عامل لکه برگی گیاه پاپیتال

پاپیتال ( Hedera helix L.) گیاهی چندساله و همیشه سبز از خانواده Araliaceae است و بهعنوان گیاه پوششی در فضای سبز شهری بسیار مورداستفاده قرار میگیرد. در نمونه برداری انجام شده طی سال 1396، برگهای آلوده به لکه برگی از گیاه پاپیتال در بوستان بعثت شهر تهران جمعآوری گردید. پس از بررسی نمونه های آلوده، اندام پیکنیدیوم بر روی سطوح آلوده مشاهده گردید. جهت جداسازی، ضدعفونی سطحی بخشهای آلوده با استفاده از پنبه آغشته به الکل %90 انجام گردید و نمونه ها به تشتک پتری حاوی کاغذ صافی مرطوب و استریل انتقال داده شدند. خالص سازی به روش تک کنیدی در محیط کشت آب- آگار انجام گردید. جهت شناسایی گونه های قارچی بر اساس ویژگیهای ریخت شناسی طبق توصیف شناسایی بوئرما و همکاران ( Boerema et al.,2004) عمل شد. بر این اساس از محیطهای کشت مالت- آگار و آرد یولاف- آگار جهت شناسایی استفاده گردید. شناسایی مولکولی جدایه ها نیز با استفاده از تکثیر نواحی ژنومی ITS (آغازگرهای ITS1 و (ITS4، ناحیه ژنی اکتین (آغازگرهای ACT-512F و (ACT-783R و ناحیه ژنی بتا توبولین (آغازگرهای TUB2Fd و (TUB4Rd انجام شد. درنتیجه، گونه Stagonosporopsis dorenboschii شناسایی شد. قطر پرگنه قارچ در محیطهای کشت مالت- آگار و آرد یولاف- آگار پس از هفت روز در شرایط 13 ساعت روشنایی و 11 ساعت تاریکی و دمای 22 درجه سلسیوس 6/5 و 5 سانتیمتر به دست آمد. گونه دارای پیکنیدیوم کروی شکل و دارای یک یا چند روزنه پاپیلدار هستند. کنیدیومها بیرنگ، تک سلولی، دوکیشکل به ابعاد 4-5(-4/3) × 1/5-2 (-1/8) میکرومتر واجد یک یا دو قطره چربی در قطبین میباشند. مقایسه توالی نواحی ITS-rDNA، اکتین و بتاتوبولین این جدایه ها با توالیهای موجود در بانک ژن به ترتیب %95، % 92 و %90 شباهت را با سایر جدایه های گونه S. dorenboschii نشان داد. آزمون بیماریزایی در شرایط گلخانه و با سوسپانسیون کنیدیوم در غلظت 106 کنیدی در میلی لیتر انجام شد. نتایج آزمون بیماری زایی نشان داد که گونه S. dorenboschii سبب ایجاد علائم لکه برگی در گیاه پس از دو هفته میشود.