کاربرد تکنیک های MLPA و PCR در تشخیص تغییرات مولکولی در بیماران حاد لنفوئیدی

لوسمی حاد لنفوییدی یک بیماری هتروژن از نظر مولکولی ، کلینیکی و سیتوژنیک میباشد. درسالهای اخیر تمرکز بر مطالعه نقش مارکرهای مولکولی در پاتوژنز بیماری باعث جهش فزاینده ای در تشخیص و درمان شده است بنابراین امید میرود با توجه به یافته های سیتوژنیک و مارکرهای مولکولی شناخته شده ،اقداماتی در جهت درمان موثر و افزایش بقای انها انجام شود .با بوجود امدن روش های جدید مولکولی بتدریج دقت، حساسیت و ویژگی ، افزایش و زمان رسیدن به جواب در انها کاهش یافت از جمله این روشهای مولکولی میتوان به MLPAاشاره کرد . در این مطالعه به شناسایی تغییرات مولکولی مبتلایان به لوسمی حاد لنفوییدی با استفاده ار این روش پرداخته شد. روش کار. نوع مطالعه از نوع توصیفی- تحلیلی و جامعه آماری در این مطالعه 50 نمونه مغز استخوان و خون محیطی از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان کودکان تبریز که از سال 1392 تا 1395مراجعه کرده بودند، مورد بررسی قرار گرفت. 5 نمونه مغز استخوان سالم و 37 مورد نمونه خون محیطی جهت نمونه های کنترل سالم نیز جمع آوری شدند. آنالیز آماری داده های حاصل از مطالعه با استفاده از نرم افزار SPSSورژن 23 انجام شد. نتایج . نتایج این بررسی نشان داد که تغییرات حذف شدگی نسبت به مضاعف شدگی بیشتر دیده شد %61.4) در مقابل.(%38.6 بیشترین تغییرات مشاهده شده در ژنها به ترتیب زیر بود : XP22 (17%), CDKN2A/B ( 15.7%), PAX5 (14.4%)و کمترین آن در RB1 (7.9%) مشاهده شد. جهت بررسی نتایج روش MLPA از روش Real-time PCR به عنوان استاندارد طلایی جهت مقایسه نتایج حاصله استفاده شد. بنابراین دو ژن EBF1, PAX5 انتخاب شده و برای آنها پرایمر با برنامه oligo7 طراحی شد. نتایج نشان داد که در بررسی انجام شده در روشMLPA ، 11بیمار در ژن PAX5 و 7 بیمار در ژن EBF1مثبت شدند. صحت و دقت روش MLPAبالای %85 برای هر دو ژن EBF1و PAX5 بود. بحث و نتیجه گیری. مهمترین مشکل این بیماران عدم پاسخ به درمان به ویژه در کودکان است و مشخص شده است که همان سلول های اولیه مسئول ایجاد لوسمی عامل عود این بیماری بوده اند.نتایج مطالعات کنونی نشان میدهند که 48 درصد از بیماران حداقل یک تغییر در نسخه ژنی را دارند.این مطالعه به عنوان اولین تجربه روش کارایی این روش را نشان داد کهMLPA یک روش سریع و مقرون به صرفه است.

کلیدواژه ها:

Real-time PCR ، MLPA ، RB1 ، IKZF1 ، .لوسمی حاد لنفوئیدی