همسانه سازی ژن FSH انسانی در E.coli بیان آندر سلول تخمدان همستر چینی

سال انتشار: 1397
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 330

نسخه کامل این مقاله ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

WHMED07_244

تاریخ نمایه سازی: 29 خرداد 1398

چکیده مقاله:

هورمون محرک فولیکولی FSH گلیکوپروتئینی هترودایمر است که در رشد و بلوغ اندامهای جنسی و صفات ثانویه در زنان و مردان موثر است در طول دهه های گذشته گنادوتروپین های قابل تزریق نقش پیشرو دردرمان ناباروری داشته اند تولید FSH در داخل کشور یکیاز اهداف مهم پیرامون این دارو است بنابراین هدف از این مطالعه تولید نیمه صنعتی FSH نوترکیب می باشد وکتور حاوی ژن FSH انسانی در باکتری E.coli DH5α انتقال و پلاسمید جداسازی و توسط لیپوفکتامین 2000 ،Germany ، Invitroge به سلول تخمدان همستر چینی ترانسفکت شد سلول ها بوسیله G-418 به مدت 10 روز تیمار وسلولهای ترانسفکت شده انتخاب شدند بیان پروتئین پس از 48 ساعت بوسیله کیت الایزا مورد بررسی قرار گرفت محصول با روش کروماتوگرافی افینیتی خالص شد جهت تایید خلوص از روش SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ استفاده شد بیان پروتئین با استفاده از تست الایزا در 450 نانومتر mIU/ml43/538 تایید شد در مرحله تخلیص با روش کروماتوگرافی افینیتی پیک مربوط به FSH در بازهزمانی حدود 7/9 دقیقه مشاهده و راندمان تخلیص 70% محاسبه شد و وجود باند 45 کیلودالتونی بر روی ژل و غشای PVDF پس از تخلیص حضور FSHرا تایید نمود در حال حاضر تولید هورمون های نو ترکیب از نیازهای اساسی در کشور ما محسوب می شود بنابریان دست یابی به این هدف ارزمند نیازمند برنامه ریزی طی دراز مدت است و ما در این پژوهش سعی در هموار کردن این راه به منظور تولید هورمون FSH انسانی به عنوان یک داروی نوترکیب موثر در درمان ناباروری نمودیم

نویسندگان

اعظم موسیوند

گروه میکروبیولوژی دانشگاه شاهد تهران

ایرج رسولی

گروه میکروبیولوژی دانشگاه شاهد تهران

مریم رضایی

گروه ژنتیک پزشکی و زیست شناسی مولکولی دانشگاه علوم پزشکی ایران تهران ایران

شکیبا درویش علیپور آستانه

گروه میکروبیولوژی دانشگاه سمنان ایران