ایجاد وبررسی پلاک های ایجاد شده سوشV4 ویروس عامل بیماری نیو کاسل توسط کشت سلولی

  • سال انتشار: 1389
  • محل انتشار: شانزدهمین کنگره دامپزشکی ایران
  • کد COI اختصاصی: THVC16_1064
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 1013
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

محمدجواد مهربانپور

موسسه تحقیقات واکسن سرم سازی رازی شیراز

ساناز سبحانی

موسسه تحقیقات واکسن سرم سازی رازی شیراز

عبدا... رحمییان

موسسه تحقیقات واکسن سرم سازی رازی شیراز

چکیده

بیماری نیوکاسل یک بیماری ویروسی است که تقریبا درتمام گونه های پرندگان ایجاد بیماری میکند به این علت از لحاظ اقتصادی در صنعت طیور از اهمییت خاصی برخوردار است سویه های بیماری زای این ویروس میتواند در شماری از سلولهای اولیه حیوانی ویا در رده سلولی بدون تریپسین رشد کند اما سویه هایی با بیماریزایی کم این ویروس مثل V4براحتی بروی سلولها رشد نمی کند در واقع توا نا یی ویروس عامل بیماری نیو کاسل جهت ایجاد پلاک در کشتهای سلولی بستگی به بیماریزایی این ویروس دارد این تحقیق به منظور ایجاد پلاک جهت بررسی تفاوتهای مورفولوژی احتمالی پلاکها در نهایت بررسی های ملکولی درسو اولیه واکسن صورت گرفت.در ابتدا سلولهای (MDCK (Madian-Darby canine kidney بصورت استاندارد بر روی پلیتهای کشت سلولی کشت داده شد در زمانی که سلولها بصورت منولا یردر آمدند ویروس فوق بر اساس روش استاندارد به سلول ها اضافه گردید رقتهای مختلفی از ویروس براساس روش استاندارد روی پلیت های کشت سلولی حاوی سلولMDCK برده شد وبا استفاده از محیط DMEM حاوی تریپسین, سولفات منیزیوم آگار ویروس توانست بر روی سلولهای فوق تکثیر نماید ایجاد CPEودر نهایت پلاک نماید .پلاکها بعد از 72 سا عت در کشت سلولی نمایان گردیدند.پلاکهای بدست امده از نظر شکل اندازه مورد بررسی قرار گرفتند با یکدیگر مقایسه گردیدند تعداد پلاک که از لحاظ شکل واندازه تفاوت داشتند بر داشت شده جهت تکثیربه تخم مرغ جنین دارSPF تلقیح گردید. 48 ساعت پس از تلقیح انکو باسیون مایع آلانتوییک حاوی هر پلاک بطور جداگانه برداشت گردید سپس نسبت به جداسازی RNA هر پلاک اقدام شد با استفاده از پرایمر bp 362 که منطقه شکستگی Fرا در بر میگرفت نسبت به انجام RT-PCR ،اقدام گردید نتایج این تحقیق نشان دادکه بهترین پلاکها در رقت 10-5 بدست امده در رقتهای10-1 تا 10-4 به دلیل غلظت ویروسها پلاکها غیر مشخص بودند در رقتهای 10-6تا10-10 به علت رقت بالای ویروس پلاکهای واضحی بدست نیامد نتایج PCR حاصل از تمام پلاک جدا شده از کشت سلولی بر روی سلولهای MDCK نشان دهنده باند bp362 بود که در کنار نمونه مثبت مورد تایید قرار گرفت.

کلیدواژه ها

بیماری نیوکاسل پلاک, کشت سلولی MDCK

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.