شناسایی عناصر الحاقی در ژن oprDایزوله های سودوموناس آیروژینوزا مقاوم به کارباپنم جدا شده از بیماران بستری در بیمارستان شهید مطهری شهر تهران

سابقه و هدف: مقاومت آنتی بیوتیکی در ایزوله های سودوموناس آیروژینوزا جدا شده از بیماران سوختگی به یک معظل جهانی تبدیل شده است. در این مطالعه شناسایی عناصر الحاقی در ایزوله های مقاوم به کارباپنم ها مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: تست های حساسیت آنتی بیوتیکی برای ایزوله های سودوموناس آیروژینوزا با استفاده از روش انتشار دیسک و MIC بر اساس رهنمود هایCLSI انجام شد. بررسی وجود متالوبتالاکتامازها و کارباپنمازها برای ایزوله ها انجام و برای شناسایی ژنهای تولید کننده بتالاکتاماز و ژن های پلاسمیدی مقاوم به آمینوگلیکوزیدها از روش های PCR و تعیین توالی استفاده گردید. برای تعیین میزان بیان ژن oprD و پمپ های ترشحی از روش Real-Time PCR استفاده شد. به منظور بررسی وجود پروتیین غشای خارجی از تکنیکSDS-PAGE و برای تایپینگ ایزوله ها از تکنیکRAPD-PCRاستفاده گردید. یافته ها: در بین ایزوله ها 10/52 درصد حاوی عنصر الحاقی ISPpu21 بودند. همچنین تمام ده ایزوله حاوی ژن بتالاکتامازblaTEM بودند. ژنهای متالوبتالاکتاماز و کارباپنماز در این ده ایزوله منفی بود، ولی ژن های rmtAaadA , aadB و armA در ده ایزوله مثبت گزارش شد. میزان بیان ژن های mexX و mexB ,mexD , mexT در ده ایزوله بترتیب 0/1 تا 1/4 برابر، 1/1 تا 3/08 برابر، 0/3 تا 8/22 برابر و 1/7 تا 35/17 برابر و میزان بیان ژن oprD در ده ایزوله از 0/57 تا 35/1 برابر بود. ارزیابی پروتیین غشای خارجی نشان داد که oprD به میزان کم توسط ده ایزوله تولید می شود. با استفاده از تکنیکRAPD-PCR نشان داده شد که 8 ایزوله از ده ایزوله مربوط به یک کلون بودند. نتیجه گیری: این مطالعه برای اولین بار یک مکانیسم مولکولی جدید به نام ISPpu21 را در ژن oprD نشان داد که با مقاومت به کارباپنم در ایزوله های سودوموناس آیروژینوزا ارتباط داشت.

کلیدواژه ها:

سوختگی ، ISPpu21 ، پورین OprD ، سودوموناس آیروژینوزا ، کارباپنم