تشخیص همزمان ویروس نیوکاسل و ویروس آنفولانزای طیور در نمونه های کلینیکی با استفاده از روش Multiplex-PCR

  • سال انتشار: 1387
  • محل انتشار: پانزدهمین کنگره دامپزشکی ایران
  • کد COI اختصاصی: THVC15_646
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 1638
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

سیدعلی قرشی

گروه میکروبیولوژی , پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری , تهران , ای

فرشته قاسمی

گروه میکروبیولوژی , پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری , تهران , ای

ریحانه صالحی تبار

گروه میکروبیولوژی , پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری , تهران , ای

مرتضی دلیری

گروه میکروبیولوژی , پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری , تهران , ای

چکیده

ویروس نیوکاسل و آنفولانزا از مهمترین عوامل عفونت زای طیور می باشند . هدف از انجام این مطالعه بهینه سازی و ارزیابی یک روش تشخیصی مولکولی Multiplex-PCR برای تشخیص همزمان ویروسهای نیوکاسل NDV و آنفولانزا AIV در نمونه های کلینیکی بوده است . ضمنا در این تحقیق, میزان اختصاصی بودن و حساسیت آزمایش نیز تعیین گردید . به منظور تشخیص , NDV پرایمرهایی از توالی نوکلئوتیدی ژن F و برای تشخیص , AIV پرایمرها از ناحیه ژن ماتریکس انتخاب شدند . در آزمایش RT-PCR قطعات DNA با اندازه های قابل انتظار 320 جفت باز برای NDV و 600 جفت باز برای AIV بدست آمد . هیچ واکنش متقاطع یا غیر اختصاصی با سایر ویروسهای تنفسی طیور مشاهده نشد . محصولات PCR در وکتور R/T 57 pTZ کلون شده و تعیین توالی آنها , اختصاصی بودن آزمایشها را تائید نمود . حساسیت آزمایش برای تشخیص NDV و AIV به ترتیب 2 x 10-2 و 3 x 10-2 50 EID تعیین شد . آزمایش Multiplex-PCR همچنین قادر به تشخیص این دو ویروس در نمونه های کلینیکی گردید . در آزمایشMultiplex-Nested-PCRحساسیت آزمایش برای شناسایی هر ویروس تا 100 برابر افزایش یافت . زمان آزمایش تا حصول نتیجه به 8 ساعت تقلیل داده شد . نتایج نشانگر آن است که از این روش می توان به عنوان یک روش سریع و حساس تشخیصی برای این دو پاتوژن مهم تنفسی طیور بهره جست .

کلیدواژه ها

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.