ارایه ی یک روش ساده و سریع برای استخراج RNA از کالوس گیاه کاهو

ترکیبات فنولی و متابولیت های ثانویه به عنوان مشکل اصلی برای تجزیه و تحلیل بیان ژن و مهندسی ژنتیک در بیولوژی و آزمایشات ژنومیک, از قبیل واکنش زنجیره ای پلی مراز نسخه برداری معکوس (RT-PCR)، ساخت کتابخانه cDNA و جداسازی RNA با کیفیت بالا می باشد(سمیه ربیعی و همکاران 1393). در کاهو, کمیت و کیفیت RNA, توسط آلودگی هایی مانند پلی ساکاریدها, پلی فنولها و پروتیین ها, که میزان آنها در طول مراحل مختلف رشد و نمو برگ فراوان می باشد, کاهش می یابد. در این بررسی, روشی بهینه استخراج RNA ارایه شد که منجر به استخراج RNAی کل با کیفیت بالا, از بافت های تمایز نیافته مانند کالوس که دارای مقادیر کمتری از این نوع آلودگی ها می باشند شد (مرضیه قنبری و همکاران 1393). از این رو از 4 بافر روی نمونه ها استفاده گردید و از بین روش های مورد مطالعه، کمیت و کیفیت RNA استخراج شده با استفاده از پلی وینیل پیرولیدون (PVP) در بافر پایه بهترین نتایج را به همراه داشت RNAی کل استخراج شده با این روش بطور موفقیت آمیزی با الکتروفورز ژل آگارز و با اسپکتوفوتومتر کیفیت و کمیت مورد بررسی قرار گرفت و مشاهده RNA های ریبوزمی و عدم حالت اسمیر روی ژل به عنوان معیاری برای تعیین نمونه ها با کیفیت بالا تلقی گردید

کلیدواژه ها:

اسپکتوفوتومتر ، کالوس ، کاهو ، PVP ، RNA