کلونینگ و تعیین خصوصیات آنزیم متیل گلی اکسال سنتاز از یک گونه ترموفیل ایرانی به عنوان آنزیم کلیدی در تولید 1 و - 2 پروپان دی ال

در آمریکا سالیانه حدود پانصد هزار تن 1 و - 2 پروپان دی ال ( پروپیلن گلیکول ) در صنایعی همچون شوینده، داروسازی، آرایشی و همچنین به عنوان ضد یخ مصرف می شود . در روش های معمول 1 و - 2 پروپان دی ال از طریق آبدهی پروپیلن اکسید تولید می شود، اما تخمیر میکروبی یکی از روش های سودمند در تولید این ماده از مواد ارزان قیمت و تجدید پذیر است . امروزه برای افزایش تولید میکروبی 1 و - 2 پروپان دی ال از روش های مهندسی متابولیک استفاده می کنند . آنزیم متیل گلی اکسال سنتاز در مسیر تولید این ماده در باکتری ها، نقش کلیدی داشته و باعث جهت یابی متابولیسم باکتری به طرف تولید 1 و - 2 پروپان دی ال می شود . در این م طالعه آنزیم متیل گلی اکسال سنتاز از یک گونه ترموفیل ایرانی تعیین توالی شد . ژن مورد نظر حاوی 399 نوکلئوتید بوده و پلی پپتید 132 E.coli BL21 (DE3) منتقل و در میزبان pET 28a (+( آمینواسیدی را رمزدهی می کند . این ژن به وکتور بیانی بیان گردید . آنزیم بیان شده با شوک حرارتی و به دنبال آن با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی خالص شد و خصوصیات سینتیکی آنزیم با استفاده از دی هیدروکسی استون فسفات به عنوان سوبسترا مورد ارزیابی قرار گرفت . با بررسی خصوصیات سینتیکی آنزیم، Km و Vmax آنزیم به ترتیب 0 / 36 mM و 0 / 4 μmol min -1 μg -1 و با تعیین فعالیت آنزیم در دماهای مختلف، دمای بهینه فعالیت آنزیم 75 °C به دست آمد . این آنزیم در مقایسه با آنزیم هایی که قبلا گزارش شده از پایداری حرارتی بالاتری برخوردار است

کلیدواژه ها:

1 و - 2 پروپان دی ال ، متیل گلی اکسال سنتاز ، کلونینگ ، خصوصیات سینتیکی