کلونینگ و بیان پروتئین ضد انعقادی هیدرودین با استفاده از وکتور pEZZ18

سال انتشار: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 857

فایل این مقاله در 5 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

NBCI08_0738

تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394

چکیده مقاله:

هیدرودین پلی پپتیدی با 66-65 اسید آمینه است که به عنوان مولکولی ضد انعقادی از غدد بزاقی زالو ترشح می شوئ.هیدرودین نوترکیب عملکرد ضد انعقادی بسیار قدرتمندی در ترومبوز های شریانی و سیاهرگی را داراست.هدف از این مطالعه بیان پروتئین هیدرودین به صورت نوترکیب در E.coli می باشد تا بمنظور مطالعات آتی مورد استفاده قرار گیرد.مواد و روش ها:با استفاده از پرایمر های طراحی شده ژن سنتتیک هیدرودین با روش PCR تکثیر شد.ژن حاصل پس از تخلیص ابتدا در pTG19-T PCR cloning vector و سپس با هضم آنزیمی توسط SacI/SalI در وکتور بیانی pEZZ18 ساب کلون و به E.coli jm107 ترنسفرم شد.بیان پروتئین نوترکیب هیرودین بر روی SDS-PAGE آنالیز و سپس وسترن بلاتینگ انجام شد.یافته ها: کلون و ساب کلون صورت گرفته با هضم آنزیمی و Colony PCR تایید شد.همچنین بیان پروتئین نوترکیب هیرودین با SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ به تایید نهایی رسید.نتیجه گیری: در این مطالعه هیرودین در وکتور pEZZ18 کلون و به E.coli jm107 ترنسفرم شده و در نهایت پروتئین نوترکیب هیرودین تایید می شود.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

پریسا بخشی

گروه بیوتکنولوژی پزشکی،انستیتیو پاستور ایران،تهران،ایران

حسن میرزا حسینی

گروه بیوتکنولوژی پزشکی،انستیتیو پاستور ایران،تهران،ایران

مسعود سعیدی جم

گروه ژنتیک و پزشکی مولکولی،دانشگاه علوم پزشکی همدان،همدان،ایران

زهرا جوانمیرپورشیرزادی

گروه بیوتکنولوژی پزشکی،انستیتیو پاستور ایران،تهران،ایران

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Chang, J.Y., et al. 1990, The structural elements of hirudin ...
  • Greinacher, A. and. Warkentin T.E, 2008, The direct thrombin inhibitor ...
  • Gritter, M.G., et al., 1990, Crystal structure of the thromb ...
  • Markwardt, F. 2002, Hirudin As Alternative _ coagulant--A Historical Review. ...
  • Mo, W., et al., 2009, A novel hirudin derivative characterized ...
  • Mureebe, I., 2007, Direct Thrombin Inhibitors: Alternatives to Heparin. ISVS, ...
  • Salzet, M., 2001, Anticoagulants and inhibitors of platelet aggregation derived ...
  • Van den Bos, A.A., et al., 1993, Safety and efficacy ...
  • Vindigni, A., et al., 2008, Probing the structure of hirudin ...
  • نمایش کامل مراجع