Y23V بهبود فعالیت و پایداری یک پروتئاز در حضور حلال های آلی با ایجاد جهش

مقدمه: استفاده از آنزیم ها در حضور حلال های آلی کاربردهای زیادی از جمله تغییر جهت تعادل ترمودینامیکی به سمت سنتز به جای هیدرولیز، سنتز شکل فضایی خاص مورد نیاز در صنایع شیمیایی و دارویی دارد. از طرفی حلال های آلی با جدا کردن مولکول های آب پروتئین، باعث تخریب ساختار سه بعدی و دناتوره شدن پروتئین می شوند. به منظور بررسی اثر افزایش انطباق SVP در آنزیم پروتئاز Y23V هدف: هدف از این پروژه ایجاد جهش یافته پذیری سطح پروتئین با سطح حلال های آلی می باشد. انجام شد و فعالیت پروتئازی با استفاده از هیدرولیز Quick-change روش: جهش زایی هدفدار با استفاده از روش و جهش یافته ها از طریق کاهش جذب در 345 نانومتر اندازه گیری شد. فعالیت آنزیمی باقی SVP توسط FAGLA مانده در حضور 50 درصد حلال های آلی به مدت 15 روز مورد بررسی قرار گرفت.و متانول به DMF در حضور حلال های آلی C باعث افزایش 50 Y23V نتیجه: نتایج نشان می دهد که جهش یافته 2 درصد شده است. فعالیت باقی مانده پس از 15 روز انکوباسیون در حضور حلال های آلی ایزوپروپانول و / میزان 5پروپانول به ترتیب حدود 22 و 33 درصد افزایش نشان می دهد. علاوه بر این، بهبود فعالیت و پایداری در حضور حلال های آلی هیدروفوب بیشتر از حلال های آلی قطبی گزارش می شود. این نتایج بر این موضوع تاکید می کندکه افزایش انطباق پذیری سطح پروتئین با سطح حلال یکی از مهمترین راهکارها برای افزایش فعالیت و پایداری آنزیم ها در حضور حلال های آلی می باشد.

کلیدواژه ها:

جهش نقطه ایی ، حلال های آلی ، فعالیت ، پایداری ، پروتئاز