بررسی تاثیر انجماد شیشهای بر بیان ژنهای کدکننده آنزیمDNAمتیل ترانسفراز

یکی از روشهای نگهداری بافت تخمدان به منظور حفظ قدرت باروری، انجماد شیشهای است که روشی ساده و فوق سریع است.مشخص شده است که غلظت بالای ضدیخهای مورد استفاده، تغییرات اسمزی و آسیبهای سرمایی وارده به بافت تخمدان طی پروسهانجماد و ذوب، میتواند بافت را دچار تغییرات اساسی در سطح بیان ژن نماید. تغییرات اپیژنتیکی نقش مهمی در تنظیم بیان ژنها دارند بنابراین هدف از این مطالعه بررسی اثر انجماد شیشهای بر میزان بیان ژنهای کدکننده آنزیمDNAمتیل ترانسفراز Dnmt1وDnmt3l ، Dnmt3b ، Dnmt3a ، Dnmt2میباشدروشها: تخمدان موشهای 6-4 هفتهای نژادNMRIدردو گروه انجمادی(NIV) Needle Immerseوکنترل قرار داده شدند.درگروه انجمادی تخمدانها ابتدا به محلولهای تعادلی و انجمادی منتقل گشته و سپس بوسیله سوزن طب سوزنی و به طور مستقیم به نیتروژن مایع منتقل شدند. مورفولوژی بافت تخمدان در گروههای کنترل و انجمادی با استفاده از رنگ آمیزی هماتوکسیلین _ ائوزین موردارزیابی قرار گرفت. سپس به منظور بررسی بیان کمی ژنهای مورد نظراز تکنیکReal-time PCRاستفاده شد. نتایج: بافتهای تخمدان در گروه انجمادی مورفولوژی طبیعی ومشابه گروه کنترل داشتند. نتایجReal-time PCRآشکار نمود که میزان بیان هر پنج ژن در گروه انجمادی نسبت به گروه کنترل افزایش پیدا کرده است که این افزایش بیان فقط برای1Dnmt3b ،Dnmt وDnmt3lمعنیدار بود. در مجموع می توان نتیجه گرفت با وجود مورفولوژی طبیعی بافت تخمدان پس از انجماد شیشهای ممکن است تغییرات ژنتیکی یا اپیژنتیکی در بافت های انجمادی صورت گیرد.

کلیدواژه ها:

انجماد شیشهای ، بافت تخمدان ، DNAمتیل ترانسفراز ، موشسوری