جداسازی و کشت سلولهای بنیادی درمال پاپیلا و بررسی بیان ژنیsox-2وβ-Catenin

مقدمه: سلولهای درمال پاپیلا، انواعی از سلولهای بنیادی بزرگسال در ناحیهی فولیکول مو بوده که در فاز رشد و طویلسازی موحضوری فعال داشته و همچنین دارای توان تمایزی قابل توجهی هستند. در ارتباط با پتانسیل این سلولها در القا رویش مو بسیاری ازمسیرهای سیگنالدهی مهم در این ناحیه فعال میباشند.هدف: هدف از این مطالعه، استخراج و کشت سلولهای درمال پاپیلا از فولیکولهای موی سبیل رت و بررسی بیان دو مارکر مهمsox-2,β-Cateninمیباشد. مواد و روشها: در ابتدا، ناحیهی درمال پاپیلا از قسمت انتهایی فولیکول سبیل رت استخراج شد و در محیط کشتDMEMحاوی 10%سرم جنین گاوی، 1% آنتیبیوتیک پنیسیلین/استرپتومایسین و 1% آمفوتریسینBکشت داده شد. در پاساژ سومRNAسلولهای کشت داده شده استخراج شد و بهcDNAتبدیل گردید. سپس با استفاده از پرایمرهای ژنهایβ-Catenin و sox-2 بیان و یا عدم بیان این ژنها بررسی شد.نتایجPCRنشان داد که ژنهایβ-Catenin و sox-2 در سلولهای درمال پاپیلای کشت شده بیان میشوند. مسیر سیگنالدهی β-Catenin/wntمسئول تمایز بسمت کراتینوسیتهای فولیکولی بوده و در سلولهای درمال پاپیلا وظیفهی القای رشد مو را داراست. درحالیکه وظیفهی فاکتور نسخه برداریsox-2 بطور کلی حفظ حالت بنیادین سلولها بوسیلهی نگهداری فعالیت خودنوسازی آنها وجلوگیری از تمایز، بوسیلهی مهار این مسیر سیگنالدهی میباشد. اما با توجه به عدم توقف رشد موها میتوان گفت که با وجود بیانsox-2 در ناحیهی درمال پاپیلاβ-Cateninمهار نشده و درنتیجه پیشنهاد میشود که در این سلولها احتمالا اهمیتsox-2بیشتر در زمینهی خودنوسازی میباشد تا جلوگیری از تمایز، و یا اینکه فاکتورهای حدواسطی بیان میشوند که مانع از مهار کامل مسیرβ-Catenin/wnt میگردند

کلیدواژه ها:

درمال پاپیلا ، فولیکول مو ، β-Catenin ، sox-2