ساخت وکتور بیانی پروتئین نوترکیب در مخمر هانسنولا پلی مورفا و بیان(GCSF)

تولید پروتئین های نوترکیب یک بازار میلیارد دلاری دارا می باشد. در میان سیستم های بیانی مختلف، سلولهای مخمری به عنوان تک سلولی های تولید کننده با ویژگی دستکاری های ژنتیکی ساده و داشتن مسیرهای ترشحی اختصاصی که در تولید پروتئین کامل و فعال وانتقال آن به خارج از سلول مؤثر می باشند، یکی از بهترین انواع سیستم های شناخته شده می باشند. در حال حاضر تکنولوژی هانسونلا به دلیل میزان بیان بالا مورد توجه جهانی قرار گرفته است.هدف از این مطالعه ، طراحی وکتور بیانی جهت بیان پروتئین های نوترکیب در هانسونلا پلی مورفا و بیان فاکتور رشد گرانولوسیتیGCSF به عنوان پروتئین کاندید در این سیستم می باشدکاست ژنی مربوط به بیان در هانسونلا پلی مورفا طراحی و سنتز شده و درE. coliکلون گردیدcDNA.کد کننده ژن فاکتور محرک رشد کلونی گرانولوسیتی در وکتور طراحی شده کلون گردید.هضم های آنزیمی به منظور تأیید قطعات کلون شده در وکتور بیانی طراحی شده بکار رفت.ماهیت توالیهای کلون شده در وکتور بیانی از طریق هضم های آنزیمی با استفاده از سایتهای طراحی شده در توالی سنتز شده و مشاهده قطعات مورد نظر در ژل آگارز ارزیابی شد گام بعدی مطالعه انتقال وکتور نوترکیب به سویه هانسونلا پلی مورفا به عنوان میزبان با روش الکتروپوریشن والقاء بیان پروتئین با متانول می باشد.

کلیدواژه ها:

هانسنولا پلی مورفا ، وکتور بیانی ، فاکتورمحرک رشدکلنی گرانولوسیت