کلونینگ و بیان ژنHER2 برای تشخیص زود هنگام سرطان سینه

مقدمه:شیوع حدوداً یک میلیونی سرطان سینه یکی از معمولترین سرطانها در میان زنان سراسر جهان میباشد. سرطان سینه هفت درصدمرگ های ناشی از سرطان را شامل میشود چندین راهبرد واکسیناسیون و شناسایی زود هنگام با استفاده ازTAA های اصلی سرطان سینه هماکنون به صورت بالینی توسعه یافتهاست. در واقع سلولهای سرطان سینه در اثر افزایش بیان یک سری از ژن ها بیش از حد طبیعیحادث می شودHER2به عنوان گیرنده تیروزین کینازی در خانواده گیرنده فاکتور رشد اپیدرمی میباشد. نقشHER2 در سرطان سینه بطور گسترده مورد مطالعه قرار گرفته است HER2تنها در30-25درصد از بیماران مبتلا به سرطان سینه شایع بوده و هدف درمانی HER2با آنتی بادی های انسانی مثل هرسپتین ثابت شده است.هدف از این تحقیق تولید پروتئین نوترکیبHER2 به منظوردرمان سلولهای سرطانی سینه می باشدمواد و روش ها:ژنHER2 با طراحی پرایمر مناسب بوسیله یPCRتکثیر شده و سپس توسط پلاسمیدpET28aدرون میزبان پروکاریوتی E.coliBL21DE3 به روش شوک حرارتی کلون گردید. بیان این ژن با استفاده ازIPTGالقا میگرددو سپس توسطSDS-PAGEبیان پروتئین بررسی شدیافته ها:این ژن در پلاسمید مذکور کلون گردید و پس از تائید فرایند کلونینگ با روش های هضم انزیمی و تعیین توالی در باکتری E.coliبیان شد سپس با تکنیک وسترن بلاتینگ بیان این ژن تائید میشود.ژنHER2 انسانی نوترکیب می تواند به عنوان آنتی ژن آشکار ساز در الایزا استفاده شود

کلیدواژه ها:

کلونینگ ، ژنHER2 ، بیان القایی