استخراج و تخلیص لیپوپلی ساکارید سالمونلا اینتریتیدیس و ارزیابی فعالیت تب زایی در خرگوش

باکتری سالمونلاجزو خانواده آ نتروباکتریاسه و باسیل های گرم منفی تاژه دار است که اکثرسروتیپ های آن توانایی حرکت دارند. لیپوپلی ساکاریدLPS عامل اصلی تعیین کننده ویرولانس باکتری است که با اتصال به سطح سلول پیوند شده و فقط در هنگام لیز شدن باکتری آزاد می شود، به آن اندوتوکسین نیز می گویند. هدف از این مطالعه استخراجLPSبا روش متانول کلروفرم و آزمایش تب زایی این ترکیب در خرگوش میباشد. روش بررسی: استخراجLPSاز باکتری سالمونلا اینتریتیدیس به روش متانول – کلروفرم انجام گردید. طی فرآیند استخراج سه لایه تشکیل گردید: لایه رویی حاوی ترکیبLPSدر متانول، لایه وسطی حاوی سلولهای تخریب شده در آب، و لایه سوم حاوی ترکیبات چربی در کلروفرم بود. سپس لایه های حاوی متانول و کلروفرم به لوله دیگریمنتقل شده و در زیر هود تبخیر گردید. آنچه باقی ماندLPSاستخراج شده باکتری بود. خلوص ترکیب استخراج شده با LPS استاندارد در ژل 12 % آگارز الکتروفورز گردید و با رنگ آمیزی نیترات نقره بررسی شد. نهایتا میزان تب زایی LPSاستخراج شده در خرگوش مورد بررسی قرار گرفت نتایج بدست آمده از این تحقیق نشان داد روش استخراج متانل – کلروفرم قادر به استخراجLPSبا درجه خلوص مشابهLPS ستاندارد می باشد. پیروژن بودن ترکیب استخراج شده حاکی از حفظ ساختار و عملکردآن می باشد.

کلیدواژه ها:

استخراج ، لیپوپلی ساکارید ، سالمونلا اینترتیدیس ، آزمون تب زایی در خرگوش