بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در اشرشیا کلی سویه BL21

سابقه وهدف:آلبومین سرم انسانی از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد.این پروتئین حامل بسیاری ازهورمون ها ومتابولیت ها در بدن می باشد و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد.از آن جایی که تهیه آن از پلاسمای خون افراد اهداکننده بسیار پرهزینه و همراه با آلودگی است تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری است. مواد و روش ها:برای تولید آلبومین انسانی نوترکیب از باکتری اشرشیا کلیسویه BL21(DE3) ، به عنوان میزبان استفاده شد. پس از سنتز ژن HSA و انتقال آن به وکتور بیانی pET22b ،پلاسمید نوترکیب pET22b/HSA بهسلول پذیرای DE3( BL21 ( انتقال یافت وکلونی های حاوی وکتور بیانی نوترکیب کشت شبانه داده شدند. تولید پروتئین آلبومین با استفاده از روش وسترن بلات تائید گردیدو تخلیص پروتئین توسط کروماتوگرافی تمایلی انجام شد. نتیجه: در این مطالعه به منظور افزایش تولید آلبومین انسانی از میان سه زمان انکوباسیون 3و 5و 24 ساعت سلول های BL21 حاوی پلاسمید نوترکیب pET22b/HSA ،مدت زمان 24 ساعت بیشترین بیان را در بر داشت و تولید این پروتئین در فضای پری پلاسم باکتری باعث ایجاد Folding مناسب آن بود. نتایج نشان می دهد که آلبومین انسانی بصورت نوترکیب و در میزبان باکتریایی می تواند تولید شود.

کلیدواژه ها:

آلبومین سرم انسانی ، BL21 (DE3) ، pET22b ، Folding