انجام Overlap PCR جهت ساخت شاتل وکتور مایکوباکتریائی ب ث ژ

سل یک عفونت باکتریایی است که می تواند تقریبا تمام اعضای بدن را درگیر نماید. با وجود درمانهای دارویی موثر علیه آن سالانه میلیونها مورد جدید به افراد آلوده اضافه می شوند.به نظر می رسد واکسیناسیون موثرترین راه مبارزه با آن میباشد.واکسن ب ث ژ تنها واکسن بکار رفته علیه سل است که دارای دو مشکل عمده میباشد. کیی مسئله کارایی بسیار متغیر، دیگری عوارض ناشی از تزریق.هدف: برای مقابله با عوارض ناشی ازتزریق ب ث ژ دراین تحقیق درصدد طراحی و ساخت شاتل وکتور ما کیوباکتریائی حاوی ژن خودکشی تیمیدین کیناز افزایش فعالیت یافته برآمدیم.تا در تحقیقات آتی با انتقال این شاتل وکتور و تولید ب ث ژ نوترکیب بیان کننده ژن خودکشی در صورت بروز عوارض خطرناک BCGitis بتوان با تزریق پیش دارو جلوی تکثیر بی رویه باکتری راگرفت. روش مطالعه: در این تحقیق ژن etk را از پلاسمید pETK و پروموتر hsp70 را از ژنوم ب ث ژ توسط PCR تکثیر وتوسط Overlap PCR بهم متصل می نماییم. یافته ها: پرایمرها به گونه ای طراحی شدند،که تعدادی از بازهای مکمل با انتهای phsp70 در ابتدای ژن etk و نیز تعدادی از بازهای مکمل با ابتدای etk در انتهای پروموتر تعبیه شود. قطعات به ترتیبی که پروموتر در بالادست ژن قرارگیرد، بهم متصل میشوند. بحث و نتیجه گیری: ب ث ژ با استفاده از پروموتر hsp70 ژن etk را بیان نموده،قادر است با تبدیل پیش داروی گانسیکلوویر به متابولیت سمی باعث از بین رفتن ب ث ژ در بدن شده و در نتیجه عوارض آن متوقف گردد.

کلیدواژه ها:

ا Overlap PCR ، پروموتر hsp70 ، ژن etk